目的建立恶性疟原虫谷氨酸脱氢酶(GDH)融合蛋白质的复性和纯化方法.方法将含有恶性疟原虫GDH全长基因的融合蛋白表达质粒GDH/pGEX-4T-1转化到宿主菌BL21,该GDH/GST融合蛋白在IPTG的诱导下获得高水平的表达,经SDS-PAGE分析表达产物主要为不溶性的包涵体.经超声酶解法、离心、变性剂/去污剂洗涤后获得包涵体.包涵体经8 mol/L尿素变性后分别采用分子筛柱层析、透析和稀释3种方法复性,并通过浊度分析、非还原SDS-PAGE等方法比较、优化复性方法和条件.复性后的GDH/GST融合蛋白经过不同柱层析方法进行纯化.结果经SDS-PAGE分析表明,GDH/GST融合蛋白表达量可占到菌体总蛋白的25
作者：李妍；宁云山；郝文波；李莉；李明
来源：第一军医大学学报 2003 年 23卷 12期
