目的研究腺病毒介导的KDR启动子驱动CD/TK融合基因(AdKDR-CDglyTK)对胃癌细胞及血管内皮细胞的选择性杀伤作用.方法选择表达KDR的MGC803细胞、ECV304细胞和不表达KDR的LS174T细胞,用腺病毒重组体AdEasy-KDR-CDglyTK和AdEasy-CMV-CDglyTK感染之,观察其感染效率并以RT-PCR方法检测转基因细胞CDglyTK的表达,然后给予不同浓度的前药5-FC及GCV处理,观察该体系对不同细胞株的杀伤效应.结果两种重组体对各细胞株的感染率相似,其感染率随腺病毒滴度的增高而递增.RT-PCR检测发现:除感染AdKDR-CDglyTK的LS174T细胞外,感染AdCMV-CDglyTK的所有细胞及感染AdKDR-CDglyTK的MGC803细胞、ECV304细胞均有目的基因CDglyTK的表达.以感染复数为100的两种腺病毒分别感染各细胞株,其表现出对前药不同的敏感性:感染AdCMV-CDglyTK的所有细胞株和感染AdKDR-CDglyTK的MGC803细胞、ECV304细胞对前药具有较高的敏感性,且其敏感性差异无显著性意义(P＞0.1);相比之下,感染AdKDR-CDglyTK的LS174T细胞对前药不敏感(P＜0.001).双自杀基因的疗效优于任一单自杀基因的疗效(P＜0.001).将感染腺病毒的细胞与未感染细胞以不同比例混合培养,观察到该体系明显的旁观者效应.结论KDR基因启动子可调控双自杀基因系统选择性杀伤表达KDR胃癌细胞及血管

作者：黄宗海；苏国强；俞金龙；厉周；范应方；周广军；宋慧娟

来源：第一军医大学学报 2005 年 25卷 8期