目的:探讨E2F转录因子1(E2F transcription factor 1, E2F-1)基因沉默对人胃癌耐药细胞株SGC-7901/DDP对顺铂敏感性的影响及可能机制。方法将SGC-7901/DDP细胞接种于六孔板,分为3组:以E2F-1沉默重组慢病毒颗粒(Lv-shRNA-E2F-1)感染SGC-7901/DDP,作为Lv-shRNA-E2F-1组;以阴性对照慢病毒颗粒(Lv-shRNA-NC)感染SGC-7901/DDP,作为Lv-shRNA-NC组;空白对照组不做任何处理。以MTT法测定转染后各组细胞对DDP的半数抑制浓度(IC50),并以AxnnexinV-PE/7-AAD双染色流式细胞术检测各组细胞凋亡率及周期分布。应用Western blot和半定量RT-PCR技术分别对各组细胞中E2F-1、survivin、Bcl-2的mRNA及蛋白水平进行检测。结果与Lv-shRNA-NC组和空白对照组相比,Lv-shRNA-E2F-1组细胞对顺铂的IC50显著降低,细胞凋亡率显著提高,细胞周期阻滞于G0/G1期,差别均有统计学意义(P<0.05);Lv-shRNA-E2F-1组E2F-1 mRNA水平较Lv-shRNA-NC组和空白对照组分别下降45.0
作者:廉超;杨杰;王晓通;谢玉波;肖强
来源:南方医科大学学报 2013 年 12期