目的 研究三七总皂苷(PNS)对K562细胞增殖、凋亡、周期的影响及其相关分子机制.方法 采用MTT法检测PNS对K562细胞增殖的影响;AO/EB双荧光染色法及Annexin V-FITC/PI双染色法观察细胞凋亡及死亡状况;流式细胞术检测K562细胞的周期变化;RT-PCR检测mTOR信号通路主要分子mRNA的表达变化;Western blot检测cleaved caspase-3蛋白、cyclin D1蛋白及mTOR信号通路主要蛋白及磷酸化蛋白的表达量变化.结果 100~800μg/mL的PNS作用于K562细胞后能够抑制细胞增殖.PNS能够上调cleaved caspase-3蛋白表达,促使K562细胞发生凋亡.并且下调cyclin D1蛋白表达,促使K562细胞阻滞在G0/G1期.同时,PNS能够抑制K562细胞mTOR mRNA表达,降低mTOR蛋白和磷酸化蛋白p-mTOR(Ser2448)、p-p70S6K(Thr229/389)及p-4E-BP1(Thr37/46)的表达,从而抑制mTOR信号通路活性.结论 PNS对体外培养K562细胞有抑制增殖,促进凋亡,使其发生周期阻滞的作用.其机制可能与PNS抑制mTOR信号通路活性、上调cleaved caspase-3蛋白表达及抑制cyclin D1蛋白表达有关.
作者:李玉云;翟玮玮;杨向荣;丁娟;阚立新
来源:南方医科大学学报 2015 年 35卷 8期