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目的 探讨阻断pannexin-1在顺铂致急性肾损伤中的作用.方法 将26只6~8周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、顺铂模型组、顺铂+Carbenoxolone处理组.顺铂模型组、顺铂+Carbenoxolone处理组予顺铂20 mg/kg腹腔注射1次,顺铂+Carbenoxolone处理组于顺铂处理前30 min、处理后24、48 h分别腹腔注射Carbenoxolone 20 mg/kg,所有组于顺铂处理72 h处死小鼠,留取血浆及肾组织样品进行下一步检测.RT-qPCR及Western blot检测肾组织内pannexin-1的表达水平;检测血浆BUN、Scr水平评估肾功能;PAS染色评估肾组织病理学改变;免疫组化检测肾损伤分子1(KIM-1)表达水平及RT-qPCR检测肾损伤分子1与中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)mRNA水平评估肾小管损伤情况;免疫荧光检测肾组织F4/80+巨噬细胞及CD4+T细胞浸润水平;RT-qPCR及Western blot检测肾组织pannexin-1的mRNA及蛋白表达水平;用终浓度50μmol/L顺铂刺激人近端小管上皮细胞株HK-2细胞4、6、12、18、24 h构建体外顺铂致急性肾损伤模型;RT-qPCR及Western blot检测HK-2细胞pannexin-1的表达水平.结果 与对照组相比,顺铂模型组肾组织pannexin-1蛋白水平及mRNA水平表达上调(P<0.005);体外实验结果显示,与对照组相比,顺铂模型组的pannexin-1蛋白水平及mRNA水平表达水平

作者:刘崇斌;黄柳维;李彩珍;沈燕婷;王骏

来源:南方医科大学学报 2019 年 39卷 5期

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作者:
刘崇斌;黄柳维;李彩珍;沈燕婷;王骏
来源:
南方医科大学学报 2019 年 39卷 5期
标签:
急性肾损伤 顺铂 肾小管上皮细胞 pannexin-1
目的 探讨阻断pannexin-1在顺铂致急性肾损伤中的作用.方法 将26只6~8周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、顺铂模型组、顺铂+Carbenoxolone处理组.顺铂模型组、顺铂+Carbenoxolone处理组予顺铂20 mg/kg腹腔注射1次,顺铂+Carbenoxolone处理组于顺铂处理前30 min、处理后24、48 h分别腹腔注射Carbenoxolone 20 mg/kg,所有组于顺铂处理72 h处死小鼠,留取血浆及肾组织样品进行下一步检测.RT-qPCR及Western blot检测肾组织内pannexin-1的表达水平;检测血浆BUN、Scr水平评估肾功能;PAS染色评估肾组织病理学改变;免疫组化检测肾损伤分子1(KIM-1)表达水平及RT-qPCR检测肾损伤分子1与中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)mRNA水平评估肾小管损伤情况;免疫荧光检测肾组织F4/80+巨噬细胞及CD4+T细胞浸润水平;RT-qPCR及Western blot检测肾组织pannexin-1的mRNA及蛋白表达水平;用终浓度50μmol/L顺铂刺激人近端小管上皮细胞株HK-2细胞4、6、12、18、24 h构建体外顺铂致急性肾损伤模型;RT-qPCR及Western blot检测HK-2细胞pannexin-1的表达水平.结果 与对照组相比,顺铂模型组肾组织pannexin-1蛋白水平及mRNA水平表达上调(P<0.005);体外实验结果显示,与对照组相比,顺铂模型组的pannexin-1蛋白水平及mRNA水平表达水平