目的 探讨缝隙连接蛋白(Cx43)蛋白对耐顺铂睾丸癌I-10/DDP细胞自噬的作用.方法 免疫印迹法检测Cx43蛋白在睾丸癌I-10细胞与耐顺铂睾丸癌I-10/DDP细胞中的表达水平;实验分为转染试剂对照组(Mock组)、阴性对照组(NC组)、过表达组(mCx43组),过表达(mCx43)Cx43基因后,通过免疫印迹法检测Cx43蛋白确定转染效率,自噬相关蛋白LC3和p62水平.mCherry-GFP-LC3B转染法和透射电镜分析Cx43基因过表达后耐顺铂睾丸癌I-10/DDP细胞自噬水平.结果 与I-10细胞相比,I-10/DDP细胞中Cx43的表达量明显降低(P<0.01);过表达Cx43基因后,与NC组相比,mCx43组中自噬相关蛋白LC3-II表达降低(P<0.01),p62表达升高(P<0.05).使用mCherry-GFP-LC3B转染法和透射电镜观察自噬水平,与NC组相比,mCx43组中细胞自噬体数量降低.结论 Cx43抑制耐顺铂睾丸癌I-10/DDP细胞自噬.
作者:苑敏;董淑英;姚言雪;门运政;毛凯锦;童旭辉
来源:南方医科大学学报 2019 年 39卷 9期