目的 探究吉非替尼对非小细胞肺癌A549和H1975细胞死亡形式的影响,并从糖酵解方面探讨其可能机制.方法 A549细胞加入浓度分别为0、20、30、40 μmol/L的吉非替尼,H1975细胞加入浓度分别为0、20、40、80 μmol/L的吉非替尼.采用MTT法检测吉非替尼对非小细胞肺癌细胞的增殖抑制作用.用乳酸试剂盒检测细胞内乳酸的变化,Western blot法检测细胞内糖酵解相关蛋白(PKM2、HK2)和PI3K-Akt-mTOR信号通路中蛋白的表达水平;2-NBDG检测细胞葡萄糖摄取能力,ATP试剂盒检测胞内ATP水平;JC-1试剂盒检测细胞线粒体膜电位,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡,Western blot法检测凋亡蛋白(Bax、Bcl-2)以及自噬标志蛋白LC3B的相对表达水平.结果 MTT结果显示吉非替尼可呈时间剂量依赖性的抑制A549和H1975细胞增殖(P＜0.05),A549细胞24、48、72 h的IC50值分别为48.6、28.6和19.7 μmol/L,H1975细胞24、48、72 h的IC50值分别为321.6、49.1和14.6 μmol/L.乳酸检测结果显示,吉非替尼抑制胞内乳酸水平(P＜0.05).Western blot结果显示,糖酵解相关蛋白PKM2、HK2表达下调(P＜0.05),PI3K-Akt-mTOR信号通路中相关蛋白表达下调(P＜0.05).吉非替尼也可以抑制A549和H1975细胞葡萄糖摄取、ATP水平(P＜0.05).JC-1试剂盒和Annexin V-FITC/PI

作者：周巧；李佳会；庞金龙；范方田；李姗姗；刘浩

来源：南方医科大学学报 2020 年 40卷 6期