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目的 探讨干扰长链编码RNA FOXCUT对鼻咽癌细胞上皮间质转化及线粒体功能的影响.方法 RT-PCR检测50例鼻咽癌患者癌组织及癌旁组织和NP69、CNE1、CNE2、SUNE2、HER2和5-8F细胞株中FOXCUT表达水平;将shRNA FOXCUT转染至CNE1细胞,随机分组为Control组、shRNA-NC组和FOXCUT-shRNA3组.采用CCK8法和克隆形成实验检测细胞增殖;显微镜观察细胞形态;免疫荧光检测Vimentin+含量;试剂盒检测氧化应激标记物SOD、MDA、LDH的水平;流式检测线粒体膜电位的变化;Western blot法检测E-cad、N-cad、Vimentin、Bax、Bcl-2、caspase-3和c-Myc蛋白表达水平.结果 与癌旁组织相比,鼻咽癌组织中FOXCUT表达水平均升高(P<0.001).与NP69细胞相比,CNE1、CNE2、SUNE2、HER2和5-8F细胞FOXCUT表达水平均升高(P<0.001).与Control组相比较,FOXCUT-shRNA3组细胞增殖倍数及克隆形成率降低(P<0.001),细胞形态呈短梭形、扁平型或圆形,细胞间的连接较为紧密,具有铺路石样特征;N-cad、Vimentin的表达水平降低,E-cad的表达水平升高(P<0.05),Vimentin+含量降低(P<0.001),MDA、LDH的含量明显升高(P<0.05),SOD的活性明显降低(P<0.05),红色荧光细胞向绿色荧光细胞转变较明显,绿色荧光细胞百分比增加,Bax/Bcl2、Cleaved cas3/cas3表达显著上升,c-Myc表达

作者:高莉莉;张雄;窦思雨;岳小丁;杨捷玲

来源:南方医科大学学报 2021 年 41卷 9期

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作者:
高莉莉;张雄;窦思雨;岳小丁;杨捷玲
来源:
南方医科大学学报 2021 年 41卷 9期
标签:
鼻咽癌;CNE1细胞;长链非编码RNA FOXCUT;上皮间质转化;氧化应激;线粒体损伤
目的 探讨干扰长链编码RNA FOXCUT对鼻咽癌细胞上皮间质转化及线粒体功能的影响.方法 RT-PCR检测50例鼻咽癌患者癌组织及癌旁组织和NP69、CNE1、CNE2、SUNE2、HER2和5-8F细胞株中FOXCUT表达水平;将shRNA FOXCUT转染至CNE1细胞,随机分组为Control组、shRNA-NC组和FOXCUT-shRNA3组.采用CCK8法和克隆形成实验检测细胞增殖;显微镜观察细胞形态;免疫荧光检测Vimentin+含量;试剂盒检测氧化应激标记物SOD、MDA、LDH的水平;流式检测线粒体膜电位的变化;Western blot法检测E-cad、N-cad、Vimentin、Bax、Bcl-2、caspase-3和c-Myc蛋白表达水平.结果 与癌旁组织相比,鼻咽癌组织中FOXCUT表达水平均升高(P<0.001).与NP69细胞相比,CNE1、CNE2、SUNE2、HER2和5-8F细胞FOXCUT表达水平均升高(P<0.001).与Control组相比较,FOXCUT-shRNA3组细胞增殖倍数及克隆形成率降低(P<0.001),细胞形态呈短梭形、扁平型或圆形,细胞间的连接较为紧密,具有铺路石样特征;N-cad、Vimentin的表达水平降低,E-cad的表达水平升高(P<0.05),Vimentin+含量降低(P<0.001),MDA、LDH的含量明显升高(P<0.05),SOD的活性明显降低(P<0.05),红色荧光细胞向绿色荧光细胞转变较明显,绿色荧光细胞百分比增加,Bax/Bcl2、Cleaved cas3/cas3表达显著上升,c-Myc表达