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目的 探讨靛玉红对大鼠骨关节炎症和损伤的作用及其机制.方法 IL-1β构建骨关节炎细胞模型;0.1、0.5、1、2μmol/L靛玉红分别与IL-1β共同处理细胞;NPAS2 siRNA或non-specific siRNA转染细胞;四甲基噻唑蓝染色法检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡;Western blot检测BAX、Bcl-2、ACAN、COL2A1、MMP-13和NPAS2蛋白含量;ELISA检测细胞培养上清液NO、PGE2和TNF-α含量,实时荧光定量PCR检测NPAS2、ACAN、COL2A1和MMP-13 mRNA含量;构建C57BL/6小鼠骨关节炎模型,Western blot检测靛玉红对骨关节组织BAX、Bcl-2、ACAN和MMP-13蛋白含量的影响.结果 0.1μmol/L靛玉红对软骨细胞增殖、凋亡、caspase-3活性、BAX和Bcl-2蛋白表达水平无显著影响;0.5、1和2μmol/L靛玉红上调细胞增殖量和Bcl-2蛋白含量,降低凋亡、caspase-3活性和BAX蛋白含量(P<0.05);0.5μmol/L靛玉红上调NPAS2、ACAN和COL2A1蛋白和mRNA含量,下调MMP-13蛋白和mRNA、NO、PGE2和TNF-α含量(P<0.05);干扰NPAS2表达可显著抑制0.5μmol/L靛玉红对IL-1β诱导的软骨细胞炎症和损伤的保护作用;小鼠骨关节炎模型中BAX和MMP-13蛋白含量上升(P<0.01),而Bcl-2(P<0.05)和ACAN(P<0.01)下降;靛玉红抑制小鼠关节组织中BAX和MMP-13蛋白含量(P<0.01),上调Bcl-2和ACAN蛋

作者:陈昕;齐秀春;曹玉净;李扬;李浩亮;王前进;艾进伟

来源:南方医科大学学报 2022 年 42卷 9期

知识库介绍

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作者:
陈昕;齐秀春;曹玉净;李扬;李浩亮;王前进;艾进伟
来源:
南方医科大学学报 2022 年 42卷 9期
标签:
靛玉红 软骨细胞 NPAS2 炎症因子 细胞外基质 骨关节炎
目的 探讨靛玉红对大鼠骨关节炎症和损伤的作用及其机制.方法 IL-1β构建骨关节炎细胞模型;0.1、0.5、1、2μmol/L靛玉红分别与IL-1β共同处理细胞;NPAS2 siRNA或non-specific siRNA转染细胞;四甲基噻唑蓝染色法检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡;Western blot检测BAX、Bcl-2、ACAN、COL2A1、MMP-13和NPAS2蛋白含量;ELISA检测细胞培养上清液NO、PGE2和TNF-α含量,实时荧光定量PCR检测NPAS2、ACAN、COL2A1和MMP-13 mRNA含量;构建C57BL/6小鼠骨关节炎模型,Western blot检测靛玉红对骨关节组织BAX、Bcl-2、ACAN和MMP-13蛋白含量的影响.结果 0.1μmol/L靛玉红对软骨细胞增殖、凋亡、caspase-3活性、BAX和Bcl-2蛋白表达水平无显著影响;0.5、1和2μmol/L靛玉红上调细胞增殖量和Bcl-2蛋白含量,降低凋亡、caspase-3活性和BAX蛋白含量(P<0.05);0.5μmol/L靛玉红上调NPAS2、ACAN和COL2A1蛋白和mRNA含量,下调MMP-13蛋白和mRNA、NO、PGE2和TNF-α含量(P<0.05);干扰NPAS2表达可显著抑制0.5μmol/L靛玉红对IL-1β诱导的软骨细胞炎症和损伤的保护作用;小鼠骨关节炎模型中BAX和MMP-13蛋白含量上升(P<0.01),而Bcl-2(P<0.05)和ACAN(P<0.01)下降;靛玉红抑制小鼠关节组织中BAX和MMP-13蛋白含量(P<0.01),上调Bcl-2和ACAN蛋