目的 探讨miR-34a介导Notch信号通路对糖尿病肾病(DN)足细胞损伤及凋亡的影响.方法 体外实验:通过RT-PCR法检测高糖(30 mmol/L)环境下足细胞中miR-34a表达水平,构建miR-34a过表达足细胞系(miR-34a组)及其阴性对照(miR-NC组),使用荧光素酶实验验证miR-34a与Notch 1的靶向关系,构建Notch 1过表达足细胞系(Notch 1组)和miR-34a、Notch 1均表达升高细胞系(miR-34+Notch 1组);采用CCK-8法检测足细胞存活情况,流式细胞法检测细胞凋亡情况,Western blot法检测细胞凋亡关蛋白水平.体内实验:通过高脂饮食和链脲佐菌素建立DN小鼠模型并分为模型组、miR-34a组(n=15/组),另选15只不做干预小鼠为对照组,miR-34a组和模型组小鼠分别尾静脉注射agomir-34a[80 mg/(kg·d)]、agomir-NC[80 mg/(kg·d)],连续注射3 d,4周后,HE染色、TUNEL法分别观察肾组织病理、凋亡情况,Western blot检测肾组织凋亡相关蛋白和Notch 1蛋白表达水平.结果 高糖环境下足细胞中miR-34a表达水平低于正常糖诱导下足细胞和高渗透压下作用下的足细胞(P<0.05),miR-34a组足细胞中Notch 1表达水平低于miR-NC组(P<0.05);Notch 1 wt/miR-34a组荧光素酶活力值低于Notch 1 wt组(P<0.05),而Notch 1 mut/miR-34a组和Notch 1 mut/miR-NC组荧光素酶活力值差异无统

作者：王欢岚；刘红；张燕敏；陈伟栋

来源：南方医科大学学报 2022 年 42卷 12期