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目的 研究特异性脱氧核酶(10-23DNAzyme)对喉癌真核细胞起始因子4E(eukaryotic initiation factor-4E,eIF4E)基因mRNA的体外切割作用.方法 设计合成针对原癌基因eIF4EmRNA编码区的1102、1289、1226位点的3个10-23DNAzyme-eIF4E,用内切酶Xhol将含有eIF4E基因mRNA的pGEM7zf+eIF4E质粒消化成线性.以此为模板体外转录出用[α-32P]UTP标记的靶eIF4E基因编码区mRNA.在37℃,pH 7.5,Mg2+离子50 mmol/L条件下,分别与3个10-23DNAzyme-eIF4E(1 μmol/L)混合进行切割反应,并比较不同Mg2+离子浓度下酶对靶mRNA的切割活性.反应产物在8

作者:滕博;辛丁;文连姬;王君影;崔树勋;金春顺

来源:中国耳鼻咽喉头颈外科 2007 年 14卷 11期

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作者:
滕博;辛丁;文连姬;王君影;崔树勋;金春顺
来源:
中国耳鼻咽喉头颈外科 2007 年 14卷 11期
标签:
DNA,催化性 真核细胞起始因子4E 基因疗法 喉肿瘤
目的 研究特异性脱氧核酶(10-23DNAzyme)对喉癌真核细胞起始因子4E(eukaryotic initiation factor-4E,eIF4E)基因mRNA的体外切割作用.方法 设计合成针对原癌基因eIF4EmRNA编码区的1102、1289、1226位点的3个10-23DNAzyme-eIF4E,用内切酶Xhol将含有eIF4E基因mRNA的pGEM7zf+eIF4E质粒消化成线性.以此为模板体外转录出用[α-32P]UTP标记的靶eIF4E基因编码区mRNA.在37℃,pH 7.5,Mg2+离子50 mmol/L条件下,分别与3个10-23DNAzyme-eIF4E(1 μmol/L)混合进行切割反应,并比较不同Mg2+离子浓度下酶对靶mRNA的切割活性.反应产物在8