目的 探讨微小RNA-548c-3p(miR-548c-3p)对喉癌细胞增殖及凋亡的影响及其作用机制.方法 用miR-548c-3p mimic、增殖细胞核抗原(PCNA)-siRNA及其阴性对照分别或同时转染喉癌TU686和M4e细胞,用qRT-PCR与Western blot法检测miR-548c-3p和PCNA的表达;MTT法和流式细胞术分别检测转染细胞的增殖和凋亡;双荧光素酶报告基因实验观察miR-548c-3p和PCNA的靶向关系.Western blot法检测PCNA、细胞周期蛋白1(CyclinD1)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、B淋巴细胞瘤-2相关蛋白(Bax)的表达.结果 miR-548c-3p的表达量在癌旁组织(0.74±0.10)、喉癌组织(1.94±0.16),TU686细胞(0.35±0.07)和M4e细胞(0.41±0.03)中均呈低表达,而PCNA mRNA和蛋白均呈高表达,差异有统计学意义(P均<0.05).证实PCNA上存在miR-548c-3p的结合位点.上调miR-548c-3p可抑制细胞增殖及CyclinD1、Bcl-2的表达,并可促进细胞凋亡及Bax的表达,差异有统计学意义(P均<0.05);上调miR-548c-3与抑制PCNA对细胞增殖及凋亡的作用相似.pcDNA-PCNA显著减弱miR-548c-3p mimic对细胞增殖和凋亡的作用.结论 miR-548c-3p通过抑制PCNA表达而降低喉癌细胞增殖能力并诱导细胞凋亡.
作者：朱姝；王平；李丹
来源：中国耳鼻咽喉头颈外科 2021 年 28卷 7期
