目的:研究野生型和突变型p53基因cDNA转染对肝癌细胞系Hep3B的作用.方法:通过采用脂质体介导转染技术,将野生型、突变型p53的真核表达重组质粒和空载体质粒分别导入一种p53和Rb基因缺失的肝癌细胞系Hep3B.结果:经G418筛选获得稳定的整合了野生型p53的克隆(wide-typep53,wt-p53)、突变型p53克隆(trans-doninant negativep53,TDN p53)和空载体克隆(pNeo).经Northern和Western印迹鉴定,wt-p53、TDN P53细胞表达p53;wt-p53细胞的p21waf1/cip1蛋白表达水平升高.wt-p53细胞生长较TDNP53、pNeo细胞缓慢,但不出现凋亡.采用0.2μg/ml阿霉素诱导这三组转染细胞,wt-p53细胞出现明显的凋亡.结论:转染野生型p53的Hep3B细胞的p53基因具有转录活性,与化疗药联合治疗Hep3B细胞引起明显的细胞凋亡.
作者：韩雨生；梁力建；黄洁夫；刘予川
来源：癌症 1999 年 18卷 6期
