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目的:建立一种以新鲜细胞进行临床肿瘤 DNA含量分析的方法。方法:血液肿瘤取肝素抗凝外固血或骨髓样本,用淋巴细胞分层液分离纯化单个核细胞;实体瘤组织则用机械法制成单细胞悬液。将细胞分成两份,一份酒精固定过夜,流式细胞术常规方法测定 DNA含量,另一份直接用 PIPES(piperazine-N,N'-bis[2-ethanesulfonic acid] disodium salt)缓冲液配制的碘化丙锭( propidium iodide,PI)染色,以流式细胞术进行 DNA含量测定,并与同期固定细胞的 DNA含量检测结果进行比较。结果:同类型的肿瘤细胞,其固定前后 G0/G1期细胞峰的变异系数( coefficient of variation,CV)没有明显差异( t检验, P >0.05)。重复实验结果显示,新鲜细胞 DNA含量分析结果稳定。结论:用 PIPES缓冲液配制的 PI染液染色新鲜细胞,可以对临床肿瘤的细胞增殖状况和 DNA倍性进行分析。

作者:陶德定;冷彦;覃吉超;余源;龚建平

来源:癌症 2001 年 20卷 5期

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作者:
陶德定;冷彦;覃吉超;余源;龚建平
来源:
癌症 2001 年 20卷 5期
标签:
流式细胞术 肿瘤 新鲜细胞 DNA含量
目的:建立一种以新鲜细胞进行临床肿瘤 DNA含量分析的方法。方法:血液肿瘤取肝素抗凝外固血或骨髓样本,用淋巴细胞分层液分离纯化单个核细胞;实体瘤组织则用机械法制成单细胞悬液。将细胞分成两份,一份酒精固定过夜,流式细胞术常规方法测定 DNA含量,另一份直接用 PIPES(piperazine-N,N'-bis[2-ethanesulfonic acid] disodium salt)缓冲液配制的碘化丙锭( propidium iodide,PI)染色,以流式细胞术进行 DNA含量测定,并与同期固定细胞的 DNA含量检测结果进行比较。结果:同类型的肿瘤细胞,其固定前后 G0/G1期细胞峰的变异系数( coefficient of variation,CV)没有明显差异( t检验, P >0.05)。重复实验结果显示,新鲜细胞 DNA含量分析结果稳定。结论:用 PIPES缓冲液配制的 PI染液染色新鲜细胞,可以对临床肿瘤的细胞增殖状况和 DNA倍性进行分析。