目的:评价氧化铁磁性纳米颗粒(nanoparticles)作为基因载体的可行性。方法:应用沉淀法制成外包葡聚糖的氧化铁磁性生物纳米颗粒(Dextran Coated Iron Oxide Nanoparticles,DCIONP)。用分光光度计及琼脂糖凝胶电泳分析氧化铁磁性生物纳米颗粒的 DNA结合力及抵抗DNASE-Ⅰ消化的作用。以绿色荧光蛋白基因为报道基因,进行用氧化铁磁性纳米颗粒作为基因载体的体外细胞转染实验。结果:电镜检测证实 DCIONP的直径在10纳米(nanometer,nm)左右。在酸性条件下,这种纳米颗粒表现出 DNA结合力和抵抗DNASE-Ⅰ消化的作用 ,从而证明DCIONP与DNA的结合是静电引力的作用。在氧化铁磁性生物纳米颗粒表面修饰阳离子聚合物多聚赖氨酸(Dextran Coated Iron Oxide Nanoparticles modified with Poly-L-Lysine,PLL-DCIONP)在中性及碱性的条件下,亦可与带阴性电荷的 DNA结合及抵抗 DNASE-Ⅰ消化的作用。 PLL-DCIONP可作为基因载体将报道基因转染入细胞,用荧光显微镜可观察到发绿色荧光的细胞。在PLL-DCIONP和质粒的质量成一定的比例时,PLL-DCIONP的转染效率高于脂质体。结论:PLL-DCIONP可作为DNA转移载体。
作者:向娟娟;朱诗国;吕红斌;阮建明;张必成;李江;李桂源
来源:癌症 2001 年 20卷 10期