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背景与目的:基因疫苗是目前肿瘤免疫基因治疗研究的热点.目前癌胚抗原阳性肿瘤的治疗效果不佳,本研究拟利用质粒pVAX1构建带有免疫佐剂白细胞介素2同步表达的癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)基因疫苗,探讨一种新的肿瘤生物治疗方法.方法:利用RT-PCR从患者肿瘤组织中钓取CEA目的基因cDNA;运用分子克隆技术,通过内部核糖体进入位点(IRES),将CEA cDNA和hIL-2cDNA连接于质粒pVAX1中,采用化学发光免疫法和ELISA双抗体夹心法分别检测CEA抗原和hIL-2因子的表达;同时用蛋白质分析软件分析和预测目的抗原的特性.结果:测序结果证实本实验所构建的重组质粒插入DNA序列无错配,质粒上所接入的CEA cDNA与GenBank公布的M29540和M17303的序列99.8

作者:黄爱强;赖延东;李秀英;顾锦法;陶莎;蔡卫斌;谢金卫;罗超权

来源:癌症 2004 年 23卷 3期

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作者:
黄爱强;赖延东;李秀英;顾锦法;陶莎;蔡卫斌;谢金卫;罗超权
来源:
癌症 2004 年 23卷 3期
标签:
癌胚抗原 基因疫苗 安全性质粒 内部核糖体进入位点 白细胞介素2
背景与目的:基因疫苗是目前肿瘤免疫基因治疗研究的热点.目前癌胚抗原阳性肿瘤的治疗效果不佳,本研究拟利用质粒pVAX1构建带有免疫佐剂白细胞介素2同步表达的癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)基因疫苗,探讨一种新的肿瘤生物治疗方法.方法:利用RT-PCR从患者肿瘤组织中钓取CEA目的基因cDNA;运用分子克隆技术,通过内部核糖体进入位点(IRES),将CEA cDNA和hIL-2cDNA连接于质粒pVAX1中,采用化学发光免疫法和ELISA双抗体夹心法分别检测CEA抗原和hIL-2因子的表达;同时用蛋白质分析软件分析和预测目的抗原的特性.结果:测序结果证实本实验所构建的重组质粒插入DNA序列无错配,质粒上所接入的CEA cDNA与GenBank公布的M29540和M17303的序列99.8