背景与目的:人乳头瘤病毒16型(human papillomavirus type 16,HPV16)是宫颈癌组织中最常见的高危HPV,其相应蛋白的血清抗体与宫颈癌的发生发展相关.本研究构建HPV16 E6重组表达载体并表达纯化获得HPV16 E6重组蛋白,用于检测不同人群血清相应抗体,初步探讨本地区HPV16 E6血清抗体反应与宫颈癌的相关性.方法:将HPV16 E6基因与pRSET-A融合表达载体连接,获得E6表达重组体,转化大肠杆菌BL21(DE3)并用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(isopropylthio-β-D-galactoside,IPTG)诱导表达.表达的包涵体变性后经Ni柱纯化,复性并经活性鉴定后,用以包被ELISA板,检测正常女性、慢性宫颈炎患者和宫颈癌患者血清抗体.同时采用荧光偏振方法分型检测宫颈癌组织HPV DNA.结果:pRSET-16E6表达重组体的工程菌经IPTG诱导后可表达Mr 24×103的HPV16 E6组氨酸融合蛋白,表达量占菌体蛋白的22.3
作者:高艳娥;郭金珠;张菊;宋天保;阎小君
来源:癌症 2006 年 25卷 11期