目的研究多发性骨髓瘤(MM)患者外周血树突状细胞(DC)的分离、培养和鉴定.方法 用塑料贴壁的外周血单个核细胞(PBMNC)来源或者免疫磁珠阴性选择分离途径,建立体外培养技术,从MM患者外周血中获取DC.结果 (1)在含粒-巨噬细胞集落刺激因子和白细胞介素-4的无血清培养基(AIM-V)中,37℃、体积分数为0.05的CO2培养箱中培养5~7 d,可获得具有典型DC形态学特征的细胞.2种分离途径得率比较无统计学意义(n=5,P>0.05).(2)同种混合淋巴细胞反应及自体抗原呈递试验证实,MM患者外周血来源DC具有很强的刺激同种异体淋巴细胞增殖能力及呈递自体抗原的能力.外周血来源DC培养5~7 d后流式细胞仪分析表明,部分细胞表达成熟DC特征性标记CD1a,部分表达共刺激分子CD80及CD86,高表达HLA-DR分子,几乎不表达单核细胞特异性标记CD14.重组人白细胞介素-3或/及重组人干细胞因子加入培养体系并不增加MM患者外周血DC得率.免疫表型也无明显改变.提示DC来源于PBMNC中单核细胞,而非CD34+造血祖细胞.结论贴壁分离法及免疫磁珠法均可获取充足数量的DC.
作者:刘振华;郭坤元;赵蓉
来源:福建医科大学学报 2006 年 40卷 1期