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目的:检测hPDGF-B基因转染对Beagle犬牙龈成纤维细胞生物学活性的影响。方法使用脂质体LipofectamineTM 2000将携带hPDGF-B基因的质粒EX-A0380-M03转染至Beagle犬牙龈成纤维细胞,观察转染后细胞的形态以及增殖的变化;流式细胞仪检测转染细胞的周期以及凋亡情况;Real-time PCR法检测转染后细胞表达Collagen I、Collagen XII、α-SM A的变化。结果转染后的牙龈成纤维细胞形态多样,但增殖显著;转染组S期细胞比率增高,转染细胞未出现凋亡;转染后细胞上调Collagen I基因的表达,下调Collagen XII和α-SM A的表达。结论 hPDGF-B基因转染牙龈成纤维细胞后,产生PDGF-BB-eGFP融合蛋白,融合蛋白可能通过自分泌和旁分泌的方式作用于牙龈成纤维细胞,从而促进细胞增殖。hPDGF-B基因转染牙龈成纤维细胞后,细胞并不能出现逆向分化,细胞对外周基质的改建能力下降,但细胞合成胶原的能力显著增强。

作者:钟泉;闫福华;李艳芬;陈超

来源:福建医科大学学报 2013 年 6期

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作者:
钟泉;闫福华;李艳芬;陈超
来源:
福建医科大学学报 2013 年 6期
标签:
成纤维细胞 基因 基因表达 牙 牙龈 转染 生物学 转基因 流式细胞术 聚合酶链反应 fibroblasts genes gene expression tooth gingiva transfection biology trans-genes flow cytometry polymerase chain reaction
目的:检测hPDGF-B基因转染对Beagle犬牙龈成纤维细胞生物学活性的影响。方法使用脂质体LipofectamineTM 2000将携带hPDGF-B基因的质粒EX-A0380-M03转染至Beagle犬牙龈成纤维细胞,观察转染后细胞的形态以及增殖的变化;流式细胞仪检测转染细胞的周期以及凋亡情况;Real-time PCR法检测转染后细胞表达Collagen I、Collagen XII、α-SM A的变化。结果转染后的牙龈成纤维细胞形态多样,但增殖显著;转染组S期细胞比率增高,转染细胞未出现凋亡;转染后细胞上调Collagen I基因的表达,下调Collagen XII和α-SM A的表达。结论 hPDGF-B基因转染牙龈成纤维细胞后,产生PDGF-BB-eGFP融合蛋白,融合蛋白可能通过自分泌和旁分泌的方式作用于牙龈成纤维细胞,从而促进细胞增殖。hPDGF-B基因转染牙龈成纤维细胞后,细胞并不能出现逆向分化,细胞对外周基质的改建能力下降,但细胞合成胶原的能力显著增强。