目的 从线粒体自噬角度探讨5-氟尿嘧啶(5-Fu)心肌毒性及黄芪甲苷(AS-Ⅳ)的干预机制.方法 体外培养大鼠心肌细胞,将细胞分为5组:正常组(A组)、5-Fu模型组(B组)、AS-Ⅳ干预组(C组)、线粒体自噬抑制剂组(D组)、线粒体自噬激活组(E组).采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法、TUNEL染色检测心肌细胞功能改变,心肌线粒体腺苷三磷酸(ATP)及膜电位水平观察线粒体功能改变,LC3Ⅱ免疫荧光染色检测线粒体自噬活性,采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白质印迹(Western blot)检测PINK1/Parkin通路PINK1、Parkin、Beclin1、LAMP、LC3基因及蛋白表达情况.结果各组细胞存活率比较,A组>D组>C组>E组>B组(F=566.153,P<0.05);各组ATP含量、膜电位比较,A组>D组>C组>B组>E组(F=15.967、13.608,P<0.05);各组细胞凋亡率、LC3Ⅱ表达水平、PINK1/Parkin通路相关mRNA表达及蛋白比较,E组>B组>C组>D组>A组(F=92.799、38.130、15.921、7.287、20.921、13.387、5.012、16.824、8.167、23.291、14.622、6.571,P<0.05).结论 5-Fu可诱导心肌线粒体损伤,且线粒体可呈现自噬过度状态,AS-Ⅳ可通过抑制线粒体自噬减轻5-Fu心肌毒性.
作者：周湘忠；杨书凤；李玉捷；陈立军；魏刚
来源：分子诊断与治疗杂志 2023 年 15卷 10期
