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目的观察可被放射线转录激活的早期生长反应基因-1(early gorwth response-1 Egr-1)启动子驱动单纯疱疹病毒胸苷激酶基因(herps simplex virus thymidine kinase tk)在肝癌细胞中的表达以及对肝癌细胞的杀伤作用.方法构建以Egr-1为启动子,以tk为目的基因的重组质粒pET,经脂质体介导转染人肝癌细胞株SMMC-7721,经G418抗性筛选、分别以0、5、7.5、10、15、20Gy剂量[60]Co-γ射线照射、RT-PCR半定量分析,比较tk基因的mRNA表达,同时,加入前药丙氧鸟苷(ganciclovir GCV),测定其对肝癌细胞的杀伤效应.结果转染后的肝癌细胞株经γ射线照射后其tkmRNA的表达较未照射组(55.2±7.24)有明显提高,以15Gy最为显著(117.2±11.1),同时,前药GCV可明显提高对转染细胞的杀伤效率(P<0.001).结论经γ射线照射后,可被放射线转录激活的Egr-1启动子不仅可引起tk基因在肝癌细胞中高效表达,而且可明显提高对肝癌细胞的杀伤效率,从而为提高自杀基因治疗肝癌的疗效以及为肝癌的基因-放射治疗的实验研究打下了坚实的基础.

作者:王学浩;范永刚;俞悦;张峰;钱建民;孔连宝;李相成

来源:肝胆外科杂志 2002 年 10卷 5期

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作者:
王学浩;范永刚;俞悦;张峰;钱建民;孔连宝;李相成
来源:
肝胆外科杂志 2002 年 10卷 5期
标签:
γ射线 启动子 肝肿瘤 基因疗法
目的观察可被放射线转录激活的早期生长反应基因-1(early gorwth response-1 Egr-1)启动子驱动单纯疱疹病毒胸苷激酶基因(herps simplex virus thymidine kinase tk)在肝癌细胞中的表达以及对肝癌细胞的杀伤作用.方法构建以Egr-1为启动子,以tk为目的基因的重组质粒pET,经脂质体介导转染人肝癌细胞株SMMC-7721,经G418抗性筛选、分别以0、5、7.5、10、15、20Gy剂量[60]Co-γ射线照射、RT-PCR半定量分析,比较tk基因的mRNA表达,同时,加入前药丙氧鸟苷(ganciclovir GCV),测定其对肝癌细胞的杀伤效应.结果转染后的肝癌细胞株经γ射线照射后其tkmRNA的表达较未照射组(55.2±7.24)有明显提高,以15Gy最为显著(117.2±11.1),同时,前药GCV可明显提高对转染细胞的杀伤效率(P<0.001).结论经γ射线照射后,可被放射线转录激活的Egr-1启动子不仅可引起tk基因在肝癌细胞中高效表达,而且可明显提高对肝癌细胞的杀伤效率,从而为提高自杀基因治疗肝癌的疗效以及为肝癌的基因-放射治疗的实验研究打下了坚实的基础.