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目的 本研究旨在分析丝裂原活化蛋白激酶13(MAPK13)在胆管癌组织及细胞中的表达水平并探讨其在胆管癌细胞增殖、侵袭和上皮间质转化(EMT)中的作用.方法 通过微阵列分析筛选胆管癌组织中差异表达的mRNA,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、蛋白印迹及免疫组化染色验证MAPK13在肿瘤组织和细胞中的表达情况.进一步通过细胞转染构建MAPK13敲低(si-MAPK13)后,通过细胞活力实验检测胆管癌细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞凋亡,Transwell法检测细胞的迁移和侵袭性.最后,通过裸鼠成瘤实验检测MAPK13对体内成瘤及相关蛋白表达的影响.结果 本研究通过微阵列分析发现MAPK13在肿瘤组织中的表达存在显著差异,进一步通过qRT-PCR、蛋白印迹和免疫组化染色分析发现,与癌旁组织比较,MAPK13在mRNA和蛋白质水平的表达情况在肿瘤组织及细胞中均显著升高且差异具有统计学意义(t=27.92,6.90;均P<0.01).进一步细胞活力检测表明,抑制MAPK13的表达后细胞增殖数量明显减少(F=32.13,P<0.01).Transwell实验则显示细胞迁移和侵袭显著降低(F=52.88,38.14;均P<0.05).与对照组比较,si-MAPK13组中E钙黏蛋白(E-cadherin)的表达较高,而N钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的表达较低,差异均具有统计学意义(F=77.00,78.73,25.9;均P<0.01).

作者:王俊;李建刚;李亮

来源:肝胆胰外科杂志 2022 年 34卷 6期

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作者:
王俊;李建刚;李亮
来源:
肝胆胰外科杂志 2022 年 34卷 6期
标签:
胆管癌 丝裂原活化蛋白激酶13(MAPK13) 细胞迁移 细胞侵袭 上皮间质转化(EMT)
目的 本研究旨在分析丝裂原活化蛋白激酶13(MAPK13)在胆管癌组织及细胞中的表达水平并探讨其在胆管癌细胞增殖、侵袭和上皮间质转化(EMT)中的作用.方法 通过微阵列分析筛选胆管癌组织中差异表达的mRNA,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、蛋白印迹及免疫组化染色验证MAPK13在肿瘤组织和细胞中的表达情况.进一步通过细胞转染构建MAPK13敲低(si-MAPK13)后,通过细胞活力实验检测胆管癌细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞凋亡,Transwell法检测细胞的迁移和侵袭性.最后,通过裸鼠成瘤实验检测MAPK13对体内成瘤及相关蛋白表达的影响.结果 本研究通过微阵列分析发现MAPK13在肿瘤组织中的表达存在显著差异,进一步通过qRT-PCR、蛋白印迹和免疫组化染色分析发现,与癌旁组织比较,MAPK13在mRNA和蛋白质水平的表达情况在肿瘤组织及细胞中均显著升高且差异具有统计学意义(t=27.92,6.90;均P<0.01).进一步细胞活力检测表明,抑制MAPK13的表达后细胞增殖数量明显减少(F=32.13,P<0.01).Transwell实验则显示细胞迁移和侵袭显著降低(F=52.88,38.14;均P<0.05).与对照组比较,si-MAPK13组中E钙黏蛋白(E-cadherin)的表达较高,而N钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的表达较低,差异均具有统计学意义(F=77.00,78.73,25.9;均P<0.01).