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目的 研究丙型肝炎病毒非结构蛋白4B(HCV-NS4B)对肝细胞细胞增殖和细胞周期的影响,探讨HCV-NS4B在HCV致病中的可能机制.方法 利用脂质体介导将空白载体PCXN2及重组质粒PCXN2-NS4B转染入LO2肝细胞,G 418筛选.RT-PCR鉴定质粒成功转染入肝细胞内.MTT法绘制生长曲线,观察NS4B对肝细胞生长的影响;流式细胞仪检测细胞周期的情况;免疫组化方法 观察PCNA,cyclinD1的表达情况.结果 NS4B转染入LO2有表达;绘制生长曲线示NS4B可促进肝细胞生长;细胞周期检测显示转染空载体PCXN2的细胞(65.28 ±6.23)

作者:杨春;李昌平;陈枫;王明勇;史小玲

来源:广东医学 2008 年 29卷 1期

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作者:
杨春;李昌平;陈枫;王明勇;史小玲
来源:
广东医学 2008 年 29卷 1期
标签:
丙型肝炎病毒 非结构蛋白4B 细胞周期 PCNA cyclinD1
目的 研究丙型肝炎病毒非结构蛋白4B(HCV-NS4B)对肝细胞细胞增殖和细胞周期的影响,探讨HCV-NS4B在HCV致病中的可能机制.方法 利用脂质体介导将空白载体PCXN2及重组质粒PCXN2-NS4B转染入LO2肝细胞,G 418筛选.RT-PCR鉴定质粒成功转染入肝细胞内.MTT法绘制生长曲线,观察NS4B对肝细胞生长的影响;流式细胞仪检测细胞周期的情况;免疫组化方法 观察PCNA,cyclinD1的表达情况.结果 NS4B转染入LO2有表达;绘制生长曲线示NS4B可促进肝细胞生长;细胞周期检测显示转染空载体PCXN2的细胞(65.28 ±6.23)