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目的 观察缺血预适应对肢体缺血再灌注后骨骼肌损伤的保护效应,探讨一氧化氮(NO)在该过程中的作用.方法 雄性Wistar大鼠32只,随机分为4组(n=8):假手术组仅进行假手术,双后肢松弛环绕橡皮圈,不阻断血流;再灌注组结扎大鼠双后肢根部4h,恢复血流灌注4h;预适应组预先阻断双后肢血流5 min,恢复血流灌注5 min,反复4次,其后进行缺血再灌注;Nω-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)处理组松带前15 min给予L-NAME 10 mg/kg,其他操作同预适应组.观察各组血浆NO、内皮素-1(ET-1)及NO/ET-1比值的变化;观察骨骼肌组织中NO、ET-1、NO/ET-1比值、丙二醛(MDA)、髓过氧化物酶(MPO)、DNA双链百分率的改变,采用免疫组织化学方法检测腓肠肌组织中凋亡相关基因Bcl-2、Bax和凋亡蛋白酶Caspase-3的蛋白表达情况,利用原位脱氧核糖核甘酸末端转移酶介导的缺口末端标记法检测各组腓肠肌细胞的凋亡情况.结果 再灌注组与假手术组比较,血浆及腓肠肌组织NO、ET-1含量明显升高,NO/ET-1比值减小,腓肠肌组织MDA、MPO含量升高,DNA双链百分率值降低,Bcl-2/Bax比值减小,Caspase-3蛋白表达明显上调.凋亡指数(AI)明显升高(P<0.01).预适应组与再灌注组比较,血浆及腓肠肌组织NO含量升高,ET-1下降,NO/ET-1比值升高;腓肠肌组织MDA、MPO含量下降,DNA双链百分

作者:刘燕;朱丽艳;彭海兵;王银环;周洪霞;张连元

来源:广东医学 2013 年 34卷 19期

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刘燕;朱丽艳;彭海兵;王银环;周洪霞;张连元
来源:
广东医学 2013 年 34卷 19期
标签:
再灌注损伤 缺血预适应 骨骼肌 一氧化氮 凋亡 ischemia-reperfusion ischemic preconditioning skeletal muscle nitrogen monoxide apoptosis
目的 观察缺血预适应对肢体缺血再灌注后骨骼肌损伤的保护效应,探讨一氧化氮(NO)在该过程中的作用.方法 雄性Wistar大鼠32只,随机分为4组(n=8):假手术组仅进行假手术,双后肢松弛环绕橡皮圈,不阻断血流;再灌注组结扎大鼠双后肢根部4h,恢复血流灌注4h;预适应组预先阻断双后肢血流5 min,恢复血流灌注5 min,反复4次,其后进行缺血再灌注;Nω-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)处理组松带前15 min给予L-NAME 10 mg/kg,其他操作同预适应组.观察各组血浆NO、内皮素-1(ET-1)及NO/ET-1比值的变化;观察骨骼肌组织中NO、ET-1、NO/ET-1比值、丙二醛(MDA)、髓过氧化物酶(MPO)、DNA双链百分率的改变,采用免疫组织化学方法检测腓肠肌组织中凋亡相关基因Bcl-2、Bax和凋亡蛋白酶Caspase-3的蛋白表达情况,利用原位脱氧核糖核甘酸末端转移酶介导的缺口末端标记法检测各组腓肠肌细胞的凋亡情况.结果 再灌注组与假手术组比较,血浆及腓肠肌组织NO、ET-1含量明显升高,NO/ET-1比值减小,腓肠肌组织MDA、MPO含量升高,DNA双链百分率值降低,Bcl-2/Bax比值减小,Caspase-3蛋白表达明显上调.凋亡指数(AI)明显升高(P<0.01).预适应组与再灌注组比较,血浆及腓肠肌组织NO含量升高,ET-1下降,NO/ET-1比值升高;腓肠肌组织MDA、MPO含量下降,DNA双链百分