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目的 观察正常氧浓度和低氧浓度对体外培养的大鼠骨髓间充质干细胞缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达及其对下游调控基因血管内皮生长因子(VEGF)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响.方法 分离雄性Wistar大鼠骨髓间充质干细胞体外培养,鉴定后分别采用正常氧浓度和低氧浓度进行细胞培养1周,电镜下观察细胞结构,RT-PCR 方法检测HIF-1α和VEGF的表达,免疫组化法检测iNOS的表达,观察低氧对体外培养的骨髓间充质干细胞HIF-1α通路的影响.结果 经鉴定体外培养的细胞为骨髓间充质干细胞,低氧培养1周对细胞结构无明显损害,正常氧浓度培养的细胞较少有HIF-1α及VEGF、iNOS的表达,低氧浓度培养的细胞HIF-1α及VEGF、iNOS的表达明显增加.结论 细胞低氧培养1周对细胞结构不会造成损害,低氧可激活HIF-1α的表达,低氧浓度培养细胞的HIF-1α及其下游调控基因VEGF和iNOS的表达较正常氧浓度培养的细胞的表达明显增加.

作者:周瀛;吴桂平;曹伟

来源:广东医学 2014 年 35卷 3期

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周瀛;吴桂平;曹伟
来源:
广东医学 2014 年 35卷 3期
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骨髓间充质干细胞 低氧 缺氧诱导因子-1α 血管内皮生长因子 诱导型一氧化氮合酶
目的 观察正常氧浓度和低氧浓度对体外培养的大鼠骨髓间充质干细胞缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达及其对下游调控基因血管内皮生长因子(VEGF)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响.方法 分离雄性Wistar大鼠骨髓间充质干细胞体外培养,鉴定后分别采用正常氧浓度和低氧浓度进行细胞培养1周,电镜下观察细胞结构,RT-PCR 方法检测HIF-1α和VEGF的表达,免疫组化法检测iNOS的表达,观察低氧对体外培养的骨髓间充质干细胞HIF-1α通路的影响.结果 经鉴定体外培养的细胞为骨髓间充质干细胞,低氧培养1周对细胞结构无明显损害,正常氧浓度培养的细胞较少有HIF-1α及VEGF、iNOS的表达,低氧浓度培养的细胞HIF-1α及VEGF、iNOS的表达明显增加.结论 细胞低氧培养1周对细胞结构不会造成损害,低氧可激活HIF-1α的表达,低氧浓度培养细胞的HIF-1α及其下游调控基因VEGF和iNOS的表达较正常氧浓度培养的细胞的表达明显增加.