目的 建立血浆中循环DNA的定量检测方法并探讨其在肝细胞癌诊断中的应用价值.方法 先提取正常健康人全血DNA,采用PCR方法扩增人球蛋白基因,然后把该内参基因的扩增产物进行梯度稀释来制备标准品,再用荧光定量PCR方法扩增不同浓度的标准品,从而建立检测血浆循环DNA的标准曲线.然后分别收集肝细胞癌患者术前血浆标本132例、肝硬化患者血浆标本55例,用已建立的方法定量检测这些患者血浆标本中的循环DNA.结果 建立了检测血液循环DNA的荧光定量PCR方法,该方法扩增效率较高;其标准曲线的Slope值为-0.308,Intercept值为28.283,R2值为0.997.肝细胞癌患者血浆中DNA浓度为(332±38) ng/mL,显著高于肝硬化患者的(57±6)ng/mL和正常健康人的(15±4)ng/mL,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 荧光定量PCR技术可用于检测血液循环DNA浓度.血循环DNA检测对肝细胞癌的诊断具有重要的应用价值.
作者：欧阳小明；陈策；吴坤河；曾涛
来源：广东医学 2015 年 36卷 15期
