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目的 通过流式细胞染色方法研究慢性乙型肝炎患者外周血CXCR5+ CD4+T细胞亚型,比较两种不同的染色缓冲体系对分析细胞表型和细胞内转录因子染色结果的影响.方法 用流式细胞术检测FoxP3 buffer (FB)染色和Transcription factor buffer (TB)染色人外周血活淋巴细胞频数占总细胞的比例(即活力),CXCR5+CD4+T细胞表型分子CD4、CXCR5、GITR表达百分比(即免疫表型),及其转录因子FoxP3表达百分比(即转录因子).结果 FB和TB染色法淋巴细胞活力差异无统计学意义;与TB染色法比较,FB染色法测得的表型分子(CD4、CXCR5、GITR)阳性细胞频数显著降低(P<0.05);与TB染色法比较,FB染色法测得的转录因子(FoxP3)阳性细胞频数显著增高(P<0.01).结论 两种流式细胞染色方法对CXCR5+ CD4+T细胞表型分子及转录因子的染色比例存在差异,同时检测CXCR5+ CD4+T细胞表型和转录因子时需要对反应体系进行优化.

作者:赵文文;张慧;丁茸;张明霞;彭劼;马世武

来源:广东医学 2016 年 37卷 7期

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作者:
赵文文;张慧;丁茸;张明霞;彭劼;马世武
来源:
广东医学 2016 年 37卷 7期
标签:
流式细胞染色方法 滤泡辅助性T细胞 表型 转录因子 flow cytometry staining protocol follicular T helper cells phenotype transcription factor
目的 通过流式细胞染色方法研究慢性乙型肝炎患者外周血CXCR5+ CD4+T细胞亚型,比较两种不同的染色缓冲体系对分析细胞表型和细胞内转录因子染色结果的影响.方法 用流式细胞术检测FoxP3 buffer (FB)染色和Transcription factor buffer (TB)染色人外周血活淋巴细胞频数占总细胞的比例(即活力),CXCR5+CD4+T细胞表型分子CD4、CXCR5、GITR表达百分比(即免疫表型),及其转录因子FoxP3表达百分比(即转录因子).结果 FB和TB染色法淋巴细胞活力差异无统计学意义;与TB染色法比较,FB染色法测得的表型分子(CD4、CXCR5、GITR)阳性细胞频数显著降低(P<0.05);与TB染色法比较,FB染色法测得的转录因子(FoxP3)阳性细胞频数显著增高(P<0.01).结论 两种流式细胞染色方法对CXCR5+ CD4+T细胞表型分子及转录因子的染色比例存在差异,同时检测CXCR5+ CD4+T细胞表型和转录因子时需要对反应体系进行优化.