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目的 探讨c-Jun氨端激酶(JNK)信号通路在周期性机械牵拉刺激人肺泡上皮A549细胞表达细胞间黏附分子-1(ICAM-1)中的作用.方法 建立离体A549细胞机械牵拉刺激模型:以大小为1 000 μstrain的牵拉力刺激细胞,机械牵拉刺激前(0 min)和机械牵拉刺激后5、15、30、60 min时间点进行观察.选用JNK特异性阻断剂SP600125,实验分空白对照组(0 min),机械牵拉5、15、30、60 min组,阻断剂预处理组,阻断剂预处理+机械牵拉5、15、30、60 min组,共10组,每组3皿细胞.采用Western blot检测细胞内JNK、磷酸化JNK、ICAM-1蛋白的表达变化.采用RT-PCR检测ICAM-1的mRNA表达变化.结果 与空白对照组比较,A549细胞经单纯机械牵拉刺激后,磷酸化JNK蛋白水平增加,以30 min时间点最为明显(P<0.05);随着机械牵拉刺激时间的延长,在60 min时间点磷酸化JNK蛋白水平下降至约基线水平,与基线水平差异无统计学意义(P>0.05).单纯机械力作用后,ICAM-1蛋白及其mRNA水平在60 min时间点有较明显增加(P<0.05).阻断剂SP600125预处理后再经机械刺激磷酸化JNK蛋白的表达水平升高不明显(P>0.05),同时ICAM-1蛋白及mRNA水平在60 min时间点增加亦不明显(P>0.05).结论 机械牵拉刺激通过激活A549细胞JNK蛋白信号通路,从而引起细胞ICAM-1的表达变化,提示JNK信

作者:胡晓波;张优仪;程德云

来源:广东医学 2016 年 37卷 19期

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作者:
胡晓波;张优仪;程德云
来源:
广东医学 2016 年 37卷 19期
标签:
机械牵拉 A549 JNK 信号转导 mechanical stretch A549 JNK signal transduction
目的 探讨c-Jun氨端激酶(JNK)信号通路在周期性机械牵拉刺激人肺泡上皮A549细胞表达细胞间黏附分子-1(ICAM-1)中的作用.方法 建立离体A549细胞机械牵拉刺激模型:以大小为1 000 μstrain的牵拉力刺激细胞,机械牵拉刺激前(0 min)和机械牵拉刺激后5、15、30、60 min时间点进行观察.选用JNK特异性阻断剂SP600125,实验分空白对照组(0 min),机械牵拉5、15、30、60 min组,阻断剂预处理组,阻断剂预处理+机械牵拉5、15、30、60 min组,共10组,每组3皿细胞.采用Western blot检测细胞内JNK、磷酸化JNK、ICAM-1蛋白的表达变化.采用RT-PCR检测ICAM-1的mRNA表达变化.结果 与空白对照组比较,A549细胞经单纯机械牵拉刺激后,磷酸化JNK蛋白水平增加,以30 min时间点最为明显(P<0.05);随着机械牵拉刺激时间的延长,在60 min时间点磷酸化JNK蛋白水平下降至约基线水平,与基线水平差异无统计学意义(P>0.05).单纯机械力作用后,ICAM-1蛋白及其mRNA水平在60 min时间点有较明显增加(P<0.05).阻断剂SP600125预处理后再经机械刺激磷酸化JNK蛋白的表达水平升高不明显(P>0.05),同时ICAM-1蛋白及mRNA水平在60 min时间点增加亦不明显(P>0.05).结论 机械牵拉刺激通过激活A549细胞JNK蛋白信号通路,从而引起细胞ICAM-1的表达变化,提示JNK信