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目的 检测干扰eIF4E基因对宫颈癌细胞中c-myc基因表达和增殖活性的影响,初步探讨eIF4E对宫颈癌细胞的作用机制.方法 两种宫颈癌细胞C33A、Hela各分为未转染组(C33A-Mock、Hela-Mock),空载对照组(C33A-NC、Hela-NC)以及eIF4E干扰组(C33A-sheIF4E、Hela-sheIF4E),用阳离子脂质体Lip2000将上述质粒转染到宫颈癌细胞,收集细胞逆转录合成CDNA后采用qRT-PCR方法检测各组细胞中eIF4E和c-myc基因mRNA相对水平的变化,采用Western blot方法检测各组细胞中上述基因蛋白水平的改变,采用MTT法绘制细胞生长曲线检测各组细胞增殖活性的变化.结果 与未转染组细胞相比,C33A-sheIF4E细胞的eIF4EmRNA和蛋白水平分别下降(71±2.1)%和(69±2.4)%,c-myc mRNA和蛋白水平分别上调(5.6±0.7)倍和下降(60±2.5)%,细胞种板后1~3d增殖无明显改变,第4、5、6、7天增殖抑制率分别为(62±1.7)%、(65±1.2)%、(69±1.4)%、(63±1.2)%;Hela-sheIF4E细胞的eIF4E mRNA和蛋白水平分别下降(68±1.9)%和(61±2.1)%,c-myc mRNA和蛋白水平分别上调(3.4±0.2)倍和下降(53±1.5)%.结论 eIF4E基因敲减导致宫颈癌细胞c-myc的蛋白表达相应下调,同时显著抑制宫颈癌细胞增殖活性,提示eIF4E通过调控c-myc的蛋白表达进而影响宫颈癌细胞的生物学行

作者:康海仙;欧阳清;庞天云;孙丽萍;李旻;王森;姚运红;胡新荣

来源:广东医学 2016 年 37卷 21期

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康海仙;欧阳清;庞天云;孙丽萍;李旻;王森;姚运红;胡新荣
来源:
广东医学 2016 年 37卷 21期
标签:
eIF4E c-myc 增殖 宫颈癌
目的 检测干扰eIF4E基因对宫颈癌细胞中c-myc基因表达和增殖活性的影响,初步探讨eIF4E对宫颈癌细胞的作用机制.方法 两种宫颈癌细胞C33A、Hela各分为未转染组(C33A-Mock、Hela-Mock),空载对照组(C33A-NC、Hela-NC)以及eIF4E干扰组(C33A-sheIF4E、Hela-sheIF4E),用阳离子脂质体Lip2000将上述质粒转染到宫颈癌细胞,收集细胞逆转录合成CDNA后采用qRT-PCR方法检测各组细胞中eIF4E和c-myc基因mRNA相对水平的变化,采用Western blot方法检测各组细胞中上述基因蛋白水平的改变,采用MTT法绘制细胞生长曲线检测各组细胞增殖活性的变化.结果 与未转染组细胞相比,C33A-sheIF4E细胞的eIF4EmRNA和蛋白水平分别下降(71±2.1)%和(69±2.4)%,c-myc mRNA和蛋白水平分别上调(5.6±0.7)倍和下降(60±2.5)%,细胞种板后1~3d增殖无明显改变,第4、5、6、7天增殖抑制率分别为(62±1.7)%、(65±1.2)%、(69±1.4)%、(63±1.2)%;Hela-sheIF4E细胞的eIF4E mRNA和蛋白水平分别下降(68±1.9)%和(61±2.1)%,c-myc mRNA和蛋白水平分别上调(3.4±0.2)倍和下降(53±1.5)%.结论 eIF4E基因敲减导致宫颈癌细胞c-myc的蛋白表达相应下调,同时显著抑制宫颈癌细胞增殖活性,提示eIF4E通过调控c-myc的蛋白表达进而影响宫颈癌细胞的生物学行