目的 探讨Smurf泛素化机制对肝纤维化发生、发展的影响,为抗纤维化靶向治疗开辟一条新途径.方法 将对数生长期一定密度的肝星状细胞(HSC),按实验分组.A组:DMEM培养液+HSC细胞+转化生长因子-β(TGF-β)(浓度为0 ng/mL);B组:DMEM培养液+HSC细胞+TGF-β(浓度为1 ng/mL);C组:DMEM培养液+HSC细胞+TGF-β(浓度为2.5 ng/mL);D组:DMEM培养液+HSC细胞+TGF-β(浓度为5ng/mL);E组:DMEM培养液+HSC细胞+TGF-β(浓度为10 ng/mL);F组:DMEM培养液+HSC细胞+TGF-β(浓度为5 ng/mL)+硼替佐米40 ng/mL.各组细胞均接种在24孔培养板,依次加入不同浓度TGF-β,并以蛋白酶体抑制剂硼替佐米作为阻断剂,探讨Smurf在肝纤维化中的作用,培养一段时间后采用免疫组化方法检测Smurf1、Smurf2、Smad7的表达及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达,RT-PCR检测胶原的表达,TGF-β的浓度梯度为0、1、2.5、5、10 ng/mL.每组均设3个复孔,并至少重复2次以上.结果 与A组相比,免疫组化结果显示,随着TGF-β浓度的增加Smurf1、Smurf2在HSC细胞中表达上调(P＜0.05);与A组比较,随着TGF-β浓度的增加Smad7蛋白在HSC中表达下调(P＜0.05);加入硼替佐米40 ng/mL后,Smurf1、Smurf2的表达没有显著变化(P ＞0.05),而Smad7的低表达受到明显抑制(P＜0.05);加入硼替佐米

作者：刘晓政；田春阳；夏永欣

来源：广东医学 2017 年 38卷 6期