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目的 构建那可丁(Nos)耐药的人结肠癌细胞株(HT-29/Nos、LoVo/Nos、SW480/Nos),探究细胞株的生物学特性.方法 采用反复大剂量结合药物浓度梯度法建立人结肠癌耐药细胞株HT-29/Nos、Lo-Vo/Nos、SW480/Nos.CCK-8法检测Nos对人结肠癌细胞株 HT -29、LoVo、SW480和耐药细胞株 HT-29/Nos、LoVo/Nos、SW480/Nos细胞的半数抑制率(IC50).细胞生长曲线的测定.流式细胞术测定各组细胞株的细胞周期变化.Real time PCR和Western blot分别检测耐药相关基因和蛋白的表达.结果 成功构建人结肠癌耐药细胞株HT-29/Nos、LoVo/Nos、SW480/Nos,耐药指数分别为6.37、7.15、6.81.HT-29/Nos细胞倍增时间较HT-29显著增长[(51.42 ±2.83)h vs(35.05 ±3.61)h,P<0.05];LoVo/Nos细胞倍增时间较LoVo显著增长[(61.93 ±4.22)h vs(38.38 ±1.88)h,P<0.05];SW480/Nos细胞倍增时间较SW480增长[(48.84 ±1.40)h vs(31.30 ±1.75)h,P<0.05].耐药细胞株HT-29/Nos、LoVo/Nos、SW480/Nos的G1期细胞数目显著增加(P<0.05),S期细胞数目显著减少(P<0.05).耐药细胞株HT-29/Nos、LoVo/Nos、SW480/Nos的P-gp和MDR-1 mRNA和蛋白表达均高于HT-29、LoVo、SW480细胞株.结论 成功构建了Nos耐药人结肠癌细胞株HT-29/Nos、LoVo/Nos、SW480/Nos,为下一步耐药性

作者:韩峥;黄晓东;刘蒙;朱庆曦;谭洁;邹艳丽;黄莎莎;田霞

来源:广东医学 2018 年 39卷 2期

知识库介绍

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韩峥;黄晓东;刘蒙;朱庆曦;谭洁;邹艳丽;黄莎莎;田霞
来源:
广东医学 2018 年 39卷 2期
标签:
人结肠癌细胞 noscapine 耐药性 生物学特性 human colon cancer cell noscapine drug resistance biological characteristics
目的 构建那可丁(Nos)耐药的人结肠癌细胞株(HT-29/Nos、LoVo/Nos、SW480/Nos),探究细胞株的生物学特性.方法 采用反复大剂量结合药物浓度梯度法建立人结肠癌耐药细胞株HT-29/Nos、Lo-Vo/Nos、SW480/Nos.CCK-8法检测Nos对人结肠癌细胞株 HT -29、LoVo、SW480和耐药细胞株 HT-29/Nos、LoVo/Nos、SW480/Nos细胞的半数抑制率(IC50).细胞生长曲线的测定.流式细胞术测定各组细胞株的细胞周期变化.Real time PCR和Western blot分别检测耐药相关基因和蛋白的表达.结果 成功构建人结肠癌耐药细胞株HT-29/Nos、LoVo/Nos、SW480/Nos,耐药指数分别为6.37、7.15、6.81.HT-29/Nos细胞倍增时间较HT-29显著增长[(51.42 ±2.83)h vs(35.05 ±3.61)h,P<0.05];LoVo/Nos细胞倍增时间较LoVo显著增长[(61.93 ±4.22)h vs(38.38 ±1.88)h,P<0.05];SW480/Nos细胞倍增时间较SW480增长[(48.84 ±1.40)h vs(31.30 ±1.75)h,P<0.05].耐药细胞株HT-29/Nos、LoVo/Nos、SW480/Nos的G1期细胞数目显著增加(P<0.05),S期细胞数目显著减少(P<0.05).耐药细胞株HT-29/Nos、LoVo/Nos、SW480/Nos的P-gp和MDR-1 mRNA和蛋白表达均高于HT-29、LoVo、SW480细胞株.结论 成功构建了Nos耐药人结肠癌细胞株HT-29/Nos、LoVo/Nos、SW480/Nos,为下一步耐药性