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目的 探讨miR-136-5p靶向NF-κB/A20调控白细胞介素(IL)-17诱导星形胶质细胞炎症反应的研究.方法 体外培养SD大鼠原代星形胶质细胞,免疫荧光染色鉴定.构建miR-136-5p过表达及表达抑制的重组慢病毒载体并转染细胞,荧光显微镜下观察并计算转染效率.Real-time PCR及抗体芯片检测IL-17刺激后各组(阴性组:转染LV-ctrl病毒、过表达组:转染LV-miR-136-5p病毒、抑制组:转染LV-miR-136-5p-inhibition病毒)大鼠星形胶质细胞炎性和趋化因子[白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)]的相对表达情况.Western blot检测p-NF-κB、A20蛋白的相对表达水平.结果 与阴性组相比,过表达组细胞炎性和趋化因子的mRNA和蛋白表达增加,A20蛋白表达减少,p-NF-κB蛋白表达增加,同时,抑制组的测定结果与之相反.结论 miR-136-5p能够通过NF-κB/A20信号通路来促进IL-17诱导的星形胶质细胞产生上述炎性和趋化因子.

作者:何基琛;宗少晖;曾高峰;彭小明;邓贵营;高云兵

来源:广东医学 2018 年 39卷 15期

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作者:
何基琛;宗少晖;曾高峰;彭小明;邓贵营;高云兵
来源:
广东医学 2018 年 39卷 15期
标签:
星形胶质细胞 miRNA NF-κB/A20信号通路 炎性因子和趋化因子
目的 探讨miR-136-5p靶向NF-κB/A20调控白细胞介素(IL)-17诱导星形胶质细胞炎症反应的研究.方法 体外培养SD大鼠原代星形胶质细胞,免疫荧光染色鉴定.构建miR-136-5p过表达及表达抑制的重组慢病毒载体并转染细胞,荧光显微镜下观察并计算转染效率.Real-time PCR及抗体芯片检测IL-17刺激后各组(阴性组:转染LV-ctrl病毒、过表达组:转染LV-miR-136-5p病毒、抑制组:转染LV-miR-136-5p-inhibition病毒)大鼠星形胶质细胞炎性和趋化因子[白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)]的相对表达情况.Western blot检测p-NF-κB、A20蛋白的相对表达水平.结果 与阴性组相比,过表达组细胞炎性和趋化因子的mRNA和蛋白表达增加,A20蛋白表达减少,p-NF-κB蛋白表达增加,同时,抑制组的测定结果与之相反.结论 miR-136-5p能够通过NF-κB/A20信号通路来促进IL-17诱导的星形胶质细胞产生上述炎性和趋化因子.