目的 研究化学合成的siRNA干扰巨噬细胞移动抑制因子(macmphage migration inhibitory factor,MIF)对大肠癌CT-26细胞凋亡的影响及其可能的机制.方法 实验组用靶向MIF的siRNA处理CT-26细胞,对照组用非特异性的siRNA处理CT-26细胞,空白组不添加任何干扰剂.流式细胞仪检测细胞的凋亡情况,ELISA检测培养上清中MIF蛋白的含量,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测MIF、CD74、Caspases3、Caspases8 mRNA的表达,Western blot检测细胞内MIF、CD74、Caspases8蛋白的表达.结果 化学合成的MIF siRNA处理大肠癌CT-26细胞24 h后,CT-26细胞凋亡率增加;实验组培养上清中MIF蛋白的含量与对照组和空白组比较显著下降;实验组MIF、CD74的mRNA表达量显著下降,Caspases3、Caspases8 mRNA的表达量明显升高;实验组细胞内MIF、CD74蛋白表达降低,而Caspases8蛋白表达升高.结论 化学合成的MIF siRNA提高了CT-26细胞的凋亡率,其机制可能是靶向MIF的siRNA降低了MIF和CD74的表达,升高了Caspases3、Caspases8的表达.
作者:吴礼浩;徐慧鲜;王丽京;臧林泉;何兴祥
来源:广东药学院学报 2011 年 27卷 3期