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目的 探讨人胚胎干细胞(human embryonic stem cells,hESCs)的体外培养及其特性.方法 hESCs接种于饲养层细胞,培养液为含20% Knockout SR的Knockout DMEM,其中添加10ng/mL碱性成纤维细胞生长因子(bFGF),通过观察细胞形态、免疫细胞化学技术分析hESCs表面标志分子SSEA-3、SSEA-4、SSEA-1和TRA-1-60的表达,鉴定hESCs的未分化状态;G显带技术分析细胞染色体核型.同时,通过分析hESCs体外形成胚胎体、体内生成畸胎瘤的情况,鉴定hESCs的分化潜能.结果 hESCs在饲养层细胞上呈克隆生长,细胞为二倍体核型.hESCs表达SSEA-3、SSEA-4、以及TRA-1-60细胞表面特征性标志.体内、外分化实验证实hESCs具备多分化潜能.结论 hESCs在体外培养条件下能够保持未分化状态和发育的全能性,为进一步探索hESCs的诱导分化,以及hESCs的应用研究提供可行性保证.

作者:孟瑛;尹辉;潘恒;周玉珍

来源:广东药学院学报 2012 年 28卷 3期

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作者:
孟瑛;尹辉;潘恒;周玉珍
来源:
广东药学院学报 2012 年 28卷 3期
标签:
人胚胎干细胞 体外 培养 未分化 全能性
目的 探讨人胚胎干细胞(human embryonic stem cells,hESCs)的体外培养及其特性.方法 hESCs接种于饲养层细胞,培养液为含20% Knockout SR的Knockout DMEM,其中添加10ng/mL碱性成纤维细胞生长因子(bFGF),通过观察细胞形态、免疫细胞化学技术分析hESCs表面标志分子SSEA-3、SSEA-4、SSEA-1和TRA-1-60的表达,鉴定hESCs的未分化状态;G显带技术分析细胞染色体核型.同时,通过分析hESCs体外形成胚胎体、体内生成畸胎瘤的情况,鉴定hESCs的分化潜能.结果 hESCs在饲养层细胞上呈克隆生长,细胞为二倍体核型.hESCs表达SSEA-3、SSEA-4、以及TRA-1-60细胞表面特征性标志.体内、外分化实验证实hESCs具备多分化潜能.结论 hESCs在体外培养条件下能够保持未分化状态和发育的全能性,为进一步探索hESCs的诱导分化,以及hESCs的应用研究提供可行性保证.