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目的 观察在非小细胞肺癌(NSCLC)细胞A549中NADPH氧化酶4(NOX4)对炎症因子IL-6表达的影响,并研究NOX4、IL-6对A549细胞侵袭过程的作用.方法 通过质粒pCMV-NOX4转染细胞,制备NOX4稳定过表达的A549细胞株,采用RT-PCR及Western blotting法对NOX4的表达进行检测;采用ELISA法检测IL-6的分泌水平;采用侵袭小室法检测A549细胞的侵袭能力;采用Western blotting法检测磷酸化Akt表达水平.结果 与对照组相比,经质粒pCMV-NOX4转染后,A549细胞中NOX4的mRNA表达和蛋白表达水平均显著升高;NOX4过表达的A549细胞中IL-6表达量增高;NOX4过表达可促进A549细胞的侵袭能力及上调细胞中Akt活性,当采用P6或Siltuximab阻断IL-6/JAK2/STAT3信号时,上述效应被部分逆转.结论 A549细胞中,NOX4过表达能提高IL-6的自分泌水平,IL-6/JAK/STAT3信号参与介导NOX4促进A549细胞侵袭的效应.阻断这两个信号通路可能是针对NSCLC侵袭转移的一个潜在治疗手段.

作者:李娟;曾诚;刘冰;李明亚

来源:广东药学院学报 2015 年 31卷 3期

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作者:
李娟;曾诚;刘冰;李明亚
来源:
广东药学院学报 2015 年 31卷 3期
标签:
NOX4 IL-6 A549细胞 侵袭 非小细胞肺癌 NOX4 IL-6 A549 cells invasion non-small cell lung cancer
目的 观察在非小细胞肺癌(NSCLC)细胞A549中NADPH氧化酶4(NOX4)对炎症因子IL-6表达的影响,并研究NOX4、IL-6对A549细胞侵袭过程的作用.方法 通过质粒pCMV-NOX4转染细胞,制备NOX4稳定过表达的A549细胞株,采用RT-PCR及Western blotting法对NOX4的表达进行检测;采用ELISA法检测IL-6的分泌水平;采用侵袭小室法检测A549细胞的侵袭能力;采用Western blotting法检测磷酸化Akt表达水平.结果 与对照组相比,经质粒pCMV-NOX4转染后,A549细胞中NOX4的mRNA表达和蛋白表达水平均显著升高;NOX4过表达的A549细胞中IL-6表达量增高;NOX4过表达可促进A549细胞的侵袭能力及上调细胞中Akt活性,当采用P6或Siltuximab阻断IL-6/JAK2/STAT3信号时,上述效应被部分逆转.结论 A549细胞中,NOX4过表达能提高IL-6的自分泌水平,IL-6/JAK/STAT3信号参与介导NOX4促进A549细胞侵袭的效应.阻断这两个信号通路可能是针对NSCLC侵袭转移的一个潜在治疗手段.