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目的 对三种脊髓灰质炎病毒检测方法的灵敏度进行比较.方法 将Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ型脊灰病毒标准株(TR株),从1×101倍系列稀释至1×107倍.选用三类方法对制备的脊灰病毒稀释液系列进行检测,比较不同检测方法的灵敏度,三类方法分别为:RD和L20B细胞分离脊灰病毒、肠道病毒通用引物EV1/EV2和脊灰病毒特异性引物UC11/UG1分别进行RT-PCR检测脊灰病毒核酸、三种商业性肠道病毒Realtime RT-PCR检测试剂盒检测脊灰病毒核酸.结果 RD和L20B细胞分离脊灰病毒的检测限可达脊灰病毒标准株的104倍稀释度;基于肠道病毒通用引物(EV1/EV2)和脊灰病毒通用引物(UC11/UG1)的两种普通RT-PCR检测限分别为103、102倍稀释度;达安、金豪、基因格三种商业性实时荧光RT-PCR试剂盒的检测限分别为:101、103、104倍稀释度.结论 RD和L20B两种细胞分离脊灰病毒的灵敏度并不亚于现有的核酸检测方法.目前部分商业性的肠道病毒通用型核酸检测试剂盒主要针对手足口设计,对脊灰病毒的检测灵敏度反而不够,应慎重选用.

作者:龚成;罗明;张铁钢

来源:国际病毒学杂志 2011 年 18卷 4期

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龚成;罗明;张铁钢
来源:
国际病毒学杂志 2011 年 18卷 4期
标签:
脊髓灰质炎病毒 病毒分离 RT-PCR Real time RT-PCR Poliovirus Virus isolation RT-PCR Real time RT-PCR
目的 对三种脊髓灰质炎病毒检测方法的灵敏度进行比较.方法 将Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ型脊灰病毒标准株(TR株),从1×101倍系列稀释至1×107倍.选用三类方法对制备的脊灰病毒稀释液系列进行检测,比较不同检测方法的灵敏度,三类方法分别为:RD和L20B细胞分离脊灰病毒、肠道病毒通用引物EV1/EV2和脊灰病毒特异性引物UC11/UG1分别进行RT-PCR检测脊灰病毒核酸、三种商业性肠道病毒Realtime RT-PCR检测试剂盒检测脊灰病毒核酸.结果 RD和L20B细胞分离脊灰病毒的检测限可达脊灰病毒标准株的104倍稀释度;基于肠道病毒通用引物(EV1/EV2)和脊灰病毒通用引物(UC11/UG1)的两种普通RT-PCR检测限分别为103、102倍稀释度;达安、金豪、基因格三种商业性实时荧光RT-PCR试剂盒的检测限分别为:101、103、104倍稀释度.结论 RD和L20B两种细胞分离脊灰病毒的灵敏度并不亚于现有的核酸检测方法.目前部分商业性的肠道病毒通用型核酸检测试剂盒主要针对手足口设计,对脊灰病毒的检测灵敏度反而不够,应慎重选用.