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目的:探讨信号转导因子与转录激活因子3(STAT3)短发夹RNA(shRNA)真核表达载体对宫颈癌SiHa细胞定植和侵袭能力的影响.方法:针对人STAT3的基因设计并合成编码小干扰RNA(siRNA)的寡核苷酸,克隆入pSilencer2.1-U6-neo质粒中,构建STAT3基因shRNA真核表达质粒,脂质体法将重组质粒转染人宫颈癌SiHa细胞.逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹(Western blot)法分别检测STAT3基因的mRNA及蛋白表达水平;软琼脂克隆形成实验和体外侵袭实验检测SiHa细胞的定植和侵袭能力.结果:构建的STAT3基因shRNA真核表达载体成功地转染人宫颈癌SiHa细胞,细胞STAT3蛋白及mRNA表达均下降(P<0.05);SiHa细胞在软琼脂中形成的克隆数和穿透Matrigel膜的细胞数均明显减少(P<0.05).结论:STAT3基因shRNA真核表达载体通过下调STAT3基因表达,抑制宫颈癌细胞的定植和侵袭能力.

作者:吴维光;陈亚琼;陈晓

来源:国际妇产科学杂志 2010 年 37卷 5期

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作者:
吴维光;陈亚琼;陈晓
来源:
国际妇产科学杂志 2010 年 37卷 5期
标签:
宫颈肿瘤 RNA干扰 肿瘤侵润 逆转录聚合酶链反应 信号转导因子与转录激活因子3
目的:探讨信号转导因子与转录激活因子3(STAT3)短发夹RNA(shRNA)真核表达载体对宫颈癌SiHa细胞定植和侵袭能力的影响.方法:针对人STAT3的基因设计并合成编码小干扰RNA(siRNA)的寡核苷酸,克隆入pSilencer2.1-U6-neo质粒中,构建STAT3基因shRNA真核表达质粒,脂质体法将重组质粒转染人宫颈癌SiHa细胞.逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹(Western blot)法分别检测STAT3基因的mRNA及蛋白表达水平;软琼脂克隆形成实验和体外侵袭实验检测SiHa细胞的定植和侵袭能力.结果:构建的STAT3基因shRNA真核表达载体成功地转染人宫颈癌SiHa细胞,细胞STAT3蛋白及mRNA表达均下降(P<0.05);SiHa细胞在软琼脂中形成的克隆数和穿透Matrigel膜的细胞数均明显减少(P<0.05).结论:STAT3基因shRNA真核表达载体通过下调STAT3基因表达,抑制宫颈癌细胞的定植和侵袭能力.