目的 探讨分析卵泡刺激素受体-β(FSHβ)锚定的外泌体(exosomes,Ex)制备及其对卵巢癌细胞诱导杀伤作用.方法 构建pDisplay-FSH重组质粒并制备exosomes,检测exosomes的形态及相关蛋白分子表达情况.通过混合淋巴细胞实验和肿瘤细胞毒性实验,观察Ex/FSHβ 对T细胞的诱导增殖及对卵巢癌细胞的杀伤作用.结果 成功构建重组质粒pDisplay-FSHβ 并稳定转染至HEK293细胞.经磷酸腺肌醇特异性磷脂酶C(PI-PLC)洗脱后,HEK293-FSHβ 组洗脱液中FSHβ 水平显著高于HEK293组 、HEK293-N1组(t值分别为17.221、19.583,均P<0.05).蛋白免疫印迹法检测显示,Ex/FSHβ 组黏附分子1(ICAM-1)、CD86及人类白细胞抗原-DR(HLA-DR)相对表达量与Ex/N1组 、Ex组比较,差异有统计学意义(t=5.147~7.886,均P<0.05).树突状细胞(DC)-Ex/FSHβ 组T细胞增殖指数与DC-Ex/N1组 、DC-Ex组及DC组比较,差异有统计学意义(t值分别为8.634、9.773、11.264,均P<0.05).效靶比在60:1时,DC-Ex/FSHβ 组杀伤率最高.效靶比在60:1时,DC-Ex/FSHβ 组干扰素-γ(INF-γ)水平 、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量与DC-Ex/N1组 、DC-Ex组及DC组比较,差异均有统计学意义(t=17.627~39.854,均P<0.05).迁移实验显示,DC-Ex/FSHβ 组细胞穿过聚碳质膜微孔
作者:岳艳;王小波;李进;周希;黄光荣
来源:中国妇幼健康研究 2017 年 28卷 12期