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目的 研究在子宫内膜癌ECC-1细胞中他莫西芬(tamoxifen,TAM)对PAX2(paired box 2)蛋白表达的调节作用,寻找在这一过程中起调节作用的microRNA.方法 用他莫西芬刺激ECC-1细胞,Western印迹检测PAX2蛋白表达的变化.利用Microcosm Targets(miRBase Sequence database)预测了PAX2相关的microRNA.用实时定量的方法检测他莫西芬刺激后ECC-1中PAX2相关microRNA表达的变化,找出差异变化明显的microRNA,合成这些micmRNA的mimics,转染入ECC-1细胞中,用Western印迹检测其对PAX2蛋白表达的影响.结果 他莫西芬刺激ECC-1细胞系后,Western印迹显示PAX2蛋白表达水平较对照组中等程度上调.实时定量PCR结果显示他莫西芬刺激ECC-1细胞后mir-135b*,mir-604,mir-585,mir-181c*表达较对照组明显下调.合成mir-135b*,mir-604,mir-585,mir-181c*的mimics并转染入ECC-1细胞后,Western印迹结果显示转入mir-585 mimics的ECC-1细胞中PAX2蛋白表达较对照组下调.结论 他莫西芬刺激可以引起ECC-1细胞中PAX2蛋白表达水平中等程度上调,通过抑制mir-585的表达减少其对PAX2 mRNA翻译的抑制可能是这一调节作用中的部分机制.

作者:李轶;赵智凝;王涛;谢桥生;孟艳玲;杨安钢

来源:医学分子生物学杂志 2010 年 07卷 4期

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作者:
李轶;赵智凝;王涛;谢桥生;孟艳玲;杨安钢
来源:
医学分子生物学杂志 2010 年 07卷 4期
标签:
microRNA 子宫内膜癌 他莫西芬 PAX2蛋白
目的 研究在子宫内膜癌ECC-1细胞中他莫西芬(tamoxifen,TAM)对PAX2(paired box 2)蛋白表达的调节作用,寻找在这一过程中起调节作用的microRNA.方法 用他莫西芬刺激ECC-1细胞,Western印迹检测PAX2蛋白表达的变化.利用Microcosm Targets(miRBase Sequence database)预测了PAX2相关的microRNA.用实时定量的方法检测他莫西芬刺激后ECC-1中PAX2相关microRNA表达的变化,找出差异变化明显的microRNA,合成这些micmRNA的mimics,转染入ECC-1细胞中,用Western印迹检测其对PAX2蛋白表达的影响.结果 他莫西芬刺激ECC-1细胞系后,Western印迹显示PAX2蛋白表达水平较对照组中等程度上调.实时定量PCR结果显示他莫西芬刺激ECC-1细胞后mir-135b*,mir-604,mir-585,mir-181c*表达较对照组明显下调.合成mir-135b*,mir-604,mir-585,mir-181c*的mimics并转染入ECC-1细胞后,Western印迹结果显示转入mir-585 mimics的ECC-1细胞中PAX2蛋白表达较对照组下调.结论 他莫西芬刺激可以引起ECC-1细胞中PAX2蛋白表达水平中等程度上调,通过抑制mir-585的表达减少其对PAX2 mRNA翻译的抑制可能是这一调节作用中的部分机制.