目的：构建和鉴定HBsAg靶向性的重组2型腺相关病毒（ adeno?associated virus， AAV2）载体。方法运用噬菌体展示技术筛选特异性结合HBsAg的多肽，通过重组PCR技术将特异性多肽插入到2型腺相关病毒（AAV2）核衣壳蛋白的587位氨基酸处，构建靶向结合HBsAg的重组AAV2病毒。流式细胞术检测重组病毒感染HepG2?215细胞的特异性。结果筛选得到HBsAg特异性多肽，序列为SSYAPYVWQ?PIA。成功构建了携带靶向 HBsAg 多肽的重组 AAV2，命名为 rAAVssyU6?hrGFP。 rAAVssyU6?hrGFP 对HepG2、 HepG2?215细胞的感染率较AAV2明显升高，对HepG2?215细胞的感染率最高， HBsAb封闭实验明显降低rAAVssyU6?hrGFP病毒感染HepG2?215细胞的效率。结论 rAAVssyU6?hrGFP对HepG2?215细胞的感染具有特异性，有望成为介导siRNA分子有效治疗HBV的靶向载体。
作者：胡斌；孙鸣；李滨；刘家俊；沈关心
来源：医学分子生物学杂志 2015 年 3期
