目的:探讨绿茶对苯并芘( benzo [ a] pyrene, B ( a) P)诱导的DNA损伤的保护作用。方法①采用稳定转染抑癌基因p53-GFP质粒的p53-/-MEF细胞( p53-GFP细胞)分为DMSO对照组, B ( a) P处理组, B ( a) P和绿茶共处理组检测各组细胞中GFP荧光的激活情况;②将WI-38细胞分为DMSO对照组, DOX阳性对照组, B (a) P处理组, B (a) P和绿茶共处理组,用Western印迹检测不同处理组WI-38细胞中p-p53,γ-H2 AX, PARP和Caspase-3蛋白表达的改变。结果荧光结果显示,10μmol/L的B ( a) P能够明显激活p53-GFP荧光,而绿茶和B ( a) P共处理后荧光激活被抑制;用Western印迹检测发现,与DMSO对照组相比, B (a) P处理的WI-38细胞中p-p53和γ-H2 AX蛋白表达水平升高, PARP和Caspase-3蛋白的切割增强,而绿茶和B ( a) P共处理的WI-38细胞中p-p53和γ-H2 AX蛋白表达水平较B ( a) P处理组明显降低, PARP和Caspase-3蛋白的切割也明显减弱。结论本研究采用稳定转染p53-GFP质粒的p53-/-MEF细胞初步观察到绿茶可能对苯并芘诱导的DNA损伤具有保护作用。在WI-38细胞中的进一步研究证明,绿茶与B ( a) P共处理能降低WI-38中p-p53和γ-H2 AX的表达水平,并且减弱PARP和
作者:刘静;桑磊;贾舒婷;张继虹;罗瑛
来源:医学分子生物学杂志 2015 年 5期