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目的 从蜡样芽孢杆菌基因组中筛选组成型启动子,并对其活性进行鉴定.方法 用Sau3 AⅠ酶切蜡样芽孢杆菌的基因组,回收片段,连接载体pCMR8a,转化DH5α感受态后涂布在氯霉素和卡那霉素的培养基上得到强启动子,并对其进行截短和顺反性实验,并检测其启动蛋白表达情况.结果 成功筛选到一个具有反向启动外源蛋白表达能力的启动子序列,并能够有效表达多种外源蛋白.结论 本实验成功筛选并验证了蜡样芽孢杆菌的一种组成型启动子,能够有效地启动外源蛋白的表达,对实验室中表达某种或某些蛋白和工业生产提供了更多的选择.

作者:汪玉婷;井申荣

来源:医学分子生物学杂志 2017 年 14卷 3期

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作者:
汪玉婷;井申荣
来源:
医学分子生物学杂志 2017 年 14卷 3期
标签:
蜡样芽孢杆菌 启动子 氯霉素乙酰转移酶 Bacillus cereus promoter chloramphenicol acetyltransferase
目的 从蜡样芽孢杆菌基因组中筛选组成型启动子,并对其活性进行鉴定.方法 用Sau3 AⅠ酶切蜡样芽孢杆菌的基因组,回收片段,连接载体pCMR8a,转化DH5α感受态后涂布在氯霉素和卡那霉素的培养基上得到强启动子,并对其进行截短和顺反性实验,并检测其启动蛋白表达情况.结果 成功筛选到一个具有反向启动外源蛋白表达能力的启动子序列,并能够有效表达多种外源蛋白.结论 本实验成功筛选并验证了蜡样芽孢杆菌的一种组成型启动子,能够有效地启动外源蛋白的表达,对实验室中表达某种或某些蛋白和工业生产提供了更多的选择.