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目的 建立一种能同时鉴定烟曲霉、黄曲霉和黑曲霉菌的多重荧光定量PCR诊断方法,并将之应用于侵袭性曲霉菌病的诊断研究.方法 构建多重荧光定量PCR方法,对该方法进行实验评价,并将之应用于侵袭性曲霉菌病患者的痰标本检测,初步评价该方法的临床诊断效能.结果 建立的多重荧光定量PCR方法,制定标准曲线,R2在0.989~0.999之间,斜率分别为-3.117、-3.583、-3.674;只与烟曲、黄曲、黑曲的DNA发生特异性反应,无非特异性扩增;最低检测浓度为1×102孢子/ml;重复性检测试验,获得Ct值标准差为0.12~0.20,变异系数为0.37%~0.80%;对分离自26例侵袭性曲霉菌病患者的56份深部痰标本进行检测,敏感率为85.7%(48/56),特异性为92.0%(46/50),阳性预测值为92.3%(48/52),阴性预测值为85.2%(46/54).结论 研究建立的多重荧光定量PCR方法检测侵袭性曲霉菌病患者的深部痰标本有较高的敏感性、特异性和阴、阳性预测值,且快速、简便,将有助于侵袭性曲霉菌病的早期准确诊断.

作者:邱桂霞;毛璞;刘晓青;杨淳;徐霞;黎毅敏

来源:国际呼吸杂志 2012 年 32卷 2期

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作者:
邱桂霞;毛璞;刘晓青;杨淳;徐霞;黎毅敏
来源:
国际呼吸杂志 2012 年 32卷 2期
标签:
曲霉菌 侵袭性曲霉菌病 实时荧光定量聚合酶链反应 诊断 Aspergillosis Invasive fungal disease Real-time polymerase chain reaction Diagnosis
目的 建立一种能同时鉴定烟曲霉、黄曲霉和黑曲霉菌的多重荧光定量PCR诊断方法,并将之应用于侵袭性曲霉菌病的诊断研究.方法 构建多重荧光定量PCR方法,对该方法进行实验评价,并将之应用于侵袭性曲霉菌病患者的痰标本检测,初步评价该方法的临床诊断效能.结果 建立的多重荧光定量PCR方法,制定标准曲线,R2在0.989~0.999之间,斜率分别为-3.117、-3.583、-3.674;只与烟曲、黄曲、黑曲的DNA发生特异性反应,无非特异性扩增;最低检测浓度为1×102孢子/ml;重复性检测试验,获得Ct值标准差为0.12~0.20,变异系数为0.37%~0.80%;对分离自26例侵袭性曲霉菌病患者的56份深部痰标本进行检测,敏感率为85.7%(48/56),特异性为92.0%(46/50),阳性预测值为92.3%(48/52),阴性预测值为85.2%(46/54).结论 研究建立的多重荧光定量PCR方法检测侵袭性曲霉菌病患者的深部痰标本有较高的敏感性、特异性和阴、阳性预测值,且快速、简便,将有助于侵袭性曲霉菌病的早期准确诊断.