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目的 用体外人肺泡上皮屏障模型,研究百草枯对人肺泡上皮屏障的影响,并初步探讨其潜在的机制.方法 通过噻唑蓝(M T T)试验和细胞计数研究百草枯对H441细胞增殖的影响,使用跨上皮电阻率(TERR)测量和荧光素标记的葡聚糖(FITC-Dextran)通透性试验研究上皮屏障的通透性,使用蛋白质印迹法(WB)研究百草枯对H441细胞中钙黏附连接蛋白E((E-cadherin)和紧密连接蛋白-1(ZO-1)表达的影响.结果 处理24 h后,从200μM浓度开始,百草枯可显著抑制细胞的增殖(P<0.05).H441单层细胞可形成上皮屏障,表现为随着培养时间的延长,TERR值逐渐升高(P<0.05),而FITC-Dextran通透性逐渐降低(P<0.05),且从第9天开始趋于平稳(P>0.05).待H441单层细胞上皮屏障完全建立后,百草枯可显著破坏H411单层细胞的上皮屏障,表现为TERR值的降低(P<0.05)和FITC-Dextran通透性的升高(P<0.05).百草枯处理24 h后,细胞中E-cadherin和ZO-1的表达均显著降低(P<0.05).结论 百草枯通过抑制E-cadherin和ZO-1的表达,破坏体外人肺泡上皮屏障模型H441单层细胞的上皮屏障,为百草枯引起急性肺损伤的机制提供了一定的理论基础.

作者:刘艳琴;史红阳;邓文静;李芳侠

来源:国际呼吸杂志 2018 年 38卷 23期

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作者:
刘艳琴;史红阳;邓文静;李芳侠
来源:
国际呼吸杂志 2018 年 38卷 23期
标签:
百草枯 急性肺损伤 肺泡上皮屏障 钙黏附蛋白E 紧密连接蛋白-1 Paraquat Acute lung injury Alveolar epithelial barrier E-cadherin Zonula occludens-1
目的 用体外人肺泡上皮屏障模型,研究百草枯对人肺泡上皮屏障的影响,并初步探讨其潜在的机制.方法 通过噻唑蓝(M T T)试验和细胞计数研究百草枯对H441细胞增殖的影响,使用跨上皮电阻率(TERR)测量和荧光素标记的葡聚糖(FITC-Dextran)通透性试验研究上皮屏障的通透性,使用蛋白质印迹法(WB)研究百草枯对H441细胞中钙黏附连接蛋白E((E-cadherin)和紧密连接蛋白-1(ZO-1)表达的影响.结果 处理24 h后,从200μM浓度开始,百草枯可显著抑制细胞的增殖(P<0.05).H441单层细胞可形成上皮屏障,表现为随着培养时间的延长,TERR值逐渐升高(P<0.05),而FITC-Dextran通透性逐渐降低(P<0.05),且从第9天开始趋于平稳(P>0.05).待H441单层细胞上皮屏障完全建立后,百草枯可显著破坏H411单层细胞的上皮屏障,表现为TERR值的降低(P<0.05)和FITC-Dextran通透性的升高(P<0.05).百草枯处理24 h后,细胞中E-cadherin和ZO-1的表达均显著降低(P<0.05).结论 百草枯通过抑制E-cadherin和ZO-1的表达,破坏体外人肺泡上皮屏障模型H441单层细胞的上皮屏障,为百草枯引起急性肺损伤的机制提供了一定的理论基础.