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目的:探讨GRHL2沉默对肺癌A549细胞的增殖、凋亡的影响。方法:利用RNA干扰技术,构建GRHL2沉默慢病毒表达载体,将肺癌A549细胞分为3个组,实验组:GRHL2沉默慢病毒感染的A549细胞系;阴性对照组:空载慢病毒感染的A549细胞系;空白对照组:不给予任何处理的A549细胞系。采用倒置荧光显微镜观察细胞绿色荧光蛋白的强度,通过实时定量聚合酶链式反应和蛋白质印迹法检测肺癌A549细胞中GRHL2 mRNA和蛋白质表达水平。采用细胞计数试剂盒检测GRHL2沉默对A549细胞增殖的影响。采用Annexin V-APC/PI细胞凋亡检测试剂盒及流式细胞术分析GRHL2沉默对A549细胞凋亡的影响。结果:实验组中GRHL2 mRNA及蛋白质表达水平均较空白对照组及阴性对照组显著降低( F=48.13、42.57, P值均<0.05),A549细胞的增殖能力明显下降( F=65.64, P<0.05),凋亡显著增强( F=56.76, P<0.05)。 结论:靶向沉默GRHL2能显著抑制肺癌A549细胞的增殖并促进其凋亡,GRHL2有望成为临床肺癌靶向治疗的新靶点。

作者:魏明莉;黄娜

来源:国际呼吸杂志 2020 年 40卷 7期

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作者:
魏明莉;黄娜
来源:
国际呼吸杂志 2020 年 40卷 7期
标签:
慢病毒感染 细胞增殖 细胞凋亡 GRHL2 A549 Lentivirus infections Cell proliferation Apoptosis GRHL2 A549
目的:探讨GRHL2沉默对肺癌A549细胞的增殖、凋亡的影响。方法:利用RNA干扰技术,构建GRHL2沉默慢病毒表达载体,将肺癌A549细胞分为3个组,实验组:GRHL2沉默慢病毒感染的A549细胞系;阴性对照组:空载慢病毒感染的A549细胞系;空白对照组:不给予任何处理的A549细胞系。采用倒置荧光显微镜观察细胞绿色荧光蛋白的强度,通过实时定量聚合酶链式反应和蛋白质印迹法检测肺癌A549细胞中GRHL2 mRNA和蛋白质表达水平。采用细胞计数试剂盒检测GRHL2沉默对A549细胞增殖的影响。采用Annexin V-APC/PI细胞凋亡检测试剂盒及流式细胞术分析GRHL2沉默对A549细胞凋亡的影响。结果:实验组中GRHL2 mRNA及蛋白质表达水平均较空白对照组及阴性对照组显著降低( F=48.13、42.57, P值均<0.05),A549细胞的增殖能力明显下降( F=65.64, P<0.05),凋亡显著增强( F=56.76, P<0.05)。 结论:靶向沉默GRHL2能显著抑制肺癌A549细胞的增殖并促进其凋亡,GRHL2有望成为临床肺癌靶向治疗的新靶点。