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目的 比较多重PCR(muhiplex PCR)、PCR-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)、半巢式PCR等3种检测棘球蚴的PCR方法,优化可区分多房棘球绦虫、细粒棘球绦虫羊株(G1型)和骆驼株(G6型)、石渠棘球绦虫和带科绦虫的方法.方法 根据细粒棘球绦虫、多房棘球绦虫、石渠棘球绦虫、带科绦虫线粒体基因序列,用DNAStar软件设计半巢式PCR通用引物,建立半巢式PCR法,并与文献报道的多重PCR法、PCR-RFLP平行扩增3份巨颈绦虫囊尾蚴、48份多房棘球蚴、8份细粒棘球蚴样本DNA,比较3种检测方法的特异性和灵敏度,并以细粒棘球蚴组织DNA为模板测定3种方法的灵敏度.结果 半巢式PCR法灵敏度最高,59份样本全部扩增出561 bp条带,但需要测序才能确定虫种;多重PCR法能扩增出3份巨颈绦虫囊尾蚴(带绦虫)样本(3/3,100

作者:周正斌;朱淮民

来源:国际医学寄生虫病杂志 2011 年 38卷 3期

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作者:
周正斌;朱淮民
来源:
国际医学寄生虫病杂志 2011 年 38卷 3期
标签:
棘球蚴 聚合酶链反应 虫种鉴别 Echinococcus Polymerase chain reaction Differentiation of species
目的 比较多重PCR(muhiplex PCR)、PCR-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)、半巢式PCR等3种检测棘球蚴的PCR方法,优化可区分多房棘球绦虫、细粒棘球绦虫羊株(G1型)和骆驼株(G6型)、石渠棘球绦虫和带科绦虫的方法.方法 根据细粒棘球绦虫、多房棘球绦虫、石渠棘球绦虫、带科绦虫线粒体基因序列,用DNAStar软件设计半巢式PCR通用引物,建立半巢式PCR法,并与文献报道的多重PCR法、PCR-RFLP平行扩增3份巨颈绦虫囊尾蚴、48份多房棘球蚴、8份细粒棘球蚴样本DNA,比较3种检测方法的特异性和灵敏度,并以细粒棘球蚴组织DNA为模板测定3种方法的灵敏度.结果 半巢式PCR法灵敏度最高,59份样本全部扩增出561 bp条带,但需要测序才能确定虫种;多重PCR法能扩增出3份巨颈绦虫囊尾蚴(带绦虫)样本(3/3,100