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目的 通过制备磺酸化125I-3,3′-二碘甲腺原氨酸(125I -3,3′-T2S),探索其纯化的最佳条件.方法 将氯磺酸(CSA)与二甲基甲酰胺(DMF)按体积比1∶4进行混合,取混合液200 μL缓慢加入125I-3,3′-T2,室温过夜后加入800 μL冰蒸馏水混匀,采用正交设计选定3个因素,每个因素3个水平,利用不同Sephadex LH-20层析柱探索酸化产物最佳纯化方案.借助下行纸层析及放射自显影对酸化产物进行鉴定.结果 成功获得酸化产物,30 mL层析柱、0.95 cm内径、0.1 mol/L盐酸、蒸馏水、洗脱液Ⅱ(1 mol/L氨水∶乙醇=1∶99,vol/vol)进行洗脱,流速0.4 mL/min,上样量40 μL为最佳纯化方案;酸化产物经过3种溶液洗脱,分别洗脱下来游离125I、125I-3,3′-T2S和125I-3,3′-T2,根据放射性计数作图分别对应3个峰.结论 成功地制备了125I-3,3′-T2S,摸索出酸化产物的最佳纯化方案.

作者:董作亮;方佩华;盖志红;高硕;刘金玲

来源:国际检验医学杂志 2008 年 29卷 3期

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作者:
董作亮;方佩华;盖志红;高硕;刘金玲
来源:
国际检验医学杂志 2008 年 29卷 3期
标签:
二甲基甲酰胺 分析样品制备方法 先天性甲状腺功能减退症
目的 通过制备磺酸化125I-3,3′-二碘甲腺原氨酸(125I -3,3′-T2S),探索其纯化的最佳条件.方法 将氯磺酸(CSA)与二甲基甲酰胺(DMF)按体积比1∶4进行混合,取混合液200 μL缓慢加入125I-3,3′-T2,室温过夜后加入800 μL冰蒸馏水混匀,采用正交设计选定3个因素,每个因素3个水平,利用不同Sephadex LH-20层析柱探索酸化产物最佳纯化方案.借助下行纸层析及放射自显影对酸化产物进行鉴定.结果 成功获得酸化产物,30 mL层析柱、0.95 cm内径、0.1 mol/L盐酸、蒸馏水、洗脱液Ⅱ(1 mol/L氨水∶乙醇=1∶99,vol/vol)进行洗脱,流速0.4 mL/min,上样量40 μL为最佳纯化方案;酸化产物经过3种溶液洗脱,分别洗脱下来游离125I、125I-3,3′-T2S和125I-3,3′-T2,根据放射性计数作图分别对应3个峰.结论 成功地制备了125I-3,3′-T2S,摸索出酸化产物的最佳纯化方案.