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目的 探讨PEG沉淀法纯化鸡胚培养流感病毒尿囊液的工艺,对PEG-6000的浓度、沉淀时间、离心力进行优化,为流感病毒抗原和抗体制备提供了便捷的手段.方法 向流感病毒鸡胚尿囊液添加PEG后进行高速离心收集沉淀,检测纯化病毒液效价、病毒形态,以及卵清蛋白含量.结果 PEG浓度为4%,沉淀时间2h,离心力8 000 g条件下,病毒能完全沉淀,杂蛋白卵清蛋白含量低,病毒颗粒完整,浓缩液中病毒血凝效价为1∶10 240.以纯化病毒免疫山羊3次后,血清抗体滴度为1∶1 024且无交叉.结论 本研究初步证明优化后的PEG沉淀法对鸡胚培养流感病毒尿囊液中的病毒浓缩、纯化达到了很好的效果.

作者:戴宗祥;耿兴良;周健;马磊;郭晨;周竟贤;高清霞;张新文;姜述德

来源:国际检验医学杂志 2014 年 35卷 1期

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作者:
戴宗祥;耿兴良;周健;马磊;郭晨;周竟贤;高清霞;张新文;姜述德
来源:
国际检验医学杂志 2014 年 35卷 1期
标签:
流感病毒 实验室技术和方法 抗原抗体复合物 influenza virus laboratory techniques and procedures antigen-antibody complex
目的 探讨PEG沉淀法纯化鸡胚培养流感病毒尿囊液的工艺,对PEG-6000的浓度、沉淀时间、离心力进行优化,为流感病毒抗原和抗体制备提供了便捷的手段.方法 向流感病毒鸡胚尿囊液添加PEG后进行高速离心收集沉淀,检测纯化病毒液效价、病毒形态,以及卵清蛋白含量.结果 PEG浓度为4%,沉淀时间2h,离心力8 000 g条件下,病毒能完全沉淀,杂蛋白卵清蛋白含量低,病毒颗粒完整,浓缩液中病毒血凝效价为1∶10 240.以纯化病毒免疫山羊3次后,血清抗体滴度为1∶1 024且无交叉.结论 本研究初步证明优化后的PEG沉淀法对鸡胚培养流感病毒尿囊液中的病毒浓缩、纯化达到了很好的效果.