目的：研究受感染宫颈上皮细胞中人乳头瘤病毒整合的检测方法与应用。方法构建串联单拷贝基因重组质粒，用于对经反向斑点杂交法基因检测为16型人乳头瘤病毒感染的宫颈脱落细胞样本进行病毒的早基因分析，通过串联单拷贝基因标准化方法，对采用荧光定量 PCR 技术分析得到的样本中 HBB、病毒早基因 E2与 E6的检测数据分析，计算 HPV 病毒整合参数与平均病毒拷贝数，推断 E2基因完整性及病毒整合发生、病毒拷贝数与已知的病变进程的相关性。结果构建的重组质粒可有效用于标准化同批次荧光定量 PCR 检测 E2基因、E6基因和 HBB 基因的数据。37例16型人乳头瘤病毒阳性宫颈细胞样本中，15例样本结果为 E2基因已破坏，包括10例高度病变组样本及5例正常组样本。不同组 E2基因完整性差异有统计学意义（P ＜0．05）。E2基因被破坏的样本平均病毒拷贝数比 E2基因完整样本显著减少（P ＜0．05）。结论本研究建立的串联单拷贝基因标准化法用于检测16型 HPV 感染的宫颈细胞样本中病毒整合导致的 E2基因破坏有效可行。
作者：余南；辜为为；刘红娥
来源：国际检验医学杂志 2014 年 17期
