目的:比较新型转染试剂阳离子聚合物聚乙烯亚胺(PEI)与脂质体2000介导的血管内皮细胞生长因子 VEGF165基因转染人胚肾细胞293T 的转染效率,为基因转染提供新的方法。方法分别采用脂质体和不同 N/P 比值的 PEI 将合成的含有绿色荧光蛋白(GFP)和 VEGF165的质粒转入293T 细胞。转染24 h 后,采用 CCK-8试剂盒检测细胞活性;转染48 h 后在荧光显微镜下观察比较两种转染方法的转染效率,并通过 ELISA 方法检测细胞上清液中 VEGF165浓度,比较两种方法的转染效果。结果当 N/P=9时,PEI 转染的细胞活性与脂质体转染相近,对细胞的毒性较小;此时,PEI 转染效率与脂质体也相似,均可达到约70%;同样,转染后细胞上清中 VEGF165浓度较未转染组提高(P <0.05),但两种方法转染组间比较差异无统计学意义(P >0.05)。结论PEI 作为一种新型的转染试剂,与脂质体相比,在一定比例范围内,具有转染效率高,对细胞毒性小且价格低廉的优势,有望成为基因转染的有效载体。
作者:曹慧玲;滕凤猛;汪小蓉;顾万建;张春兵
来源:国际检验医学杂志 2015 年 3期